| 查看: 3991 | 回复: 10 | |||
[求助]
求解pETDUET-1 原核共表达两个基因一些不懂的地方 已有3人参与
|
|||
|
有两个通过pulldown、酵母双杂验证过的两个互作蛋白，现在想在大肠杆菌中共表达这两个蛋白， 第一个问题：是在一个质粒中表达这两个蛋白好（pETDuet-1），还是分别在两个质粒中表达好(pETDuet-1/pACYCDuet-1)？ 第二个问题：假设在一个pETDuet-1共表达两个基因，而只有一个His标签（载体截图在下面），会不会因为结合力弱而只得到一个蛋白（与His直接相连的蛋白与Ni柱结合）另一个蛋白直接就是穿出，得不到互作蛋白啊？ PS: pulldown可以把这两个蛋白拉出来，那His纯化可以依靠结合力拉出来吗？  图片1.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
317求调剂
已经有6人回复
-
304求调剂
已经有4人回复
-
085700资源与环境308求调剂
已经有7人回复
-
265求调剂
已经有5人回复
-
279分求调剂 一志愿211
已经有3人回复
-
求调剂
已经有3人回复
-
一志愿吉林大学材料学硕321求调剂
已经有12人回复
-
286分人工智能专业请求调剂愿意跨考！
已经有3人回复
-
329求调剂
已经有5人回复
-
申请回稿延期一个月，编辑同意了。但系统上的时间没变，给编辑又写邮件了，没回复
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 换载体，pET21a换成pET32a的酶切位点问题
已经有19人回复
- 同一个基因片段连到两个不同载体，序列就不一样了？
已经有10人回复
- 启动子基因串联问题
已经有11人回复
- 原核表达只能在沉淀中检测出目标蛋白怎么办
已经有9人回复
- 双顺反子 表达载体的构建——求助！
已经有8人回复
- 原核表达载体目的片段终止密码子后出现ATG
已经有12人回复
- 怎样将两个基因共表达？
已经有12人回复
- 蛋白表达不出来，是什么原因造成的
已经有7人回复
- 请教：我的蛋白表达出来了，可溶，但为什么大部分都是没有活性的?
已经有17人回复
- 有谁用过pETDuet-1，交流下
已经有15人回复
- 做共表达，用什么克隆方法比较好呢？
已经有14人回复
- 将两个基因串联到启动子下面，两个基因都能表达么？
已经有54人回复
- 请教高手：转有pACYCDuet-1和pETDuet-1双载体四基因的共表达问题
已经有9人回复
- 关于基因超表达的影响
已经有5人回复
- 共表达载体只表达出一个蛋白
已经有21人回复
- 关于基因构建中开放阅读框架的若干问题
已经有7人回复
- 原核表达形成了包涵体怎么办啊？
已经有22人回复
- 【求助/交流】表达载体pCAMBIA1304表达顺序看不懂
已经有12人回复
- 原核表达菌液裂解
已经有14人回复
9楼2015-12-10 22:12:40
2楼2015-06-17 12:40:55
墨城
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1533.8
- 散金: 20
- 红花: 7
- 帖子: 444
- 在线: 41.4小时
- 虫号: 2335589
- 注册: 2013-03-10
- 性别: MM
- 专业: 环境微生物学
3楼2015-08-11 20:15:53
4楼2015-08-11 22:23:14
墨城
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1533.8
- 散金: 20
- 红花: 7
- 帖子: 444
- 在线: 41.4小时
- 虫号: 2335589
- 注册: 2013-03-10
- 性别: MM
- 专业: 环境微生物学
5楼2015-08-11 22:38:42
1993云崖
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 2928.9
- 红花: 1
- 帖子: 167
- 在线: 31.3小时
- 虫号: 2852301
- 注册: 2013-12-06
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
6楼2015-10-08 23:35:58
7楼2015-12-09 11:08:12
8楼2015-12-09 11:33:51
10楼2015-12-12 16:34:37
