| 查看: 3896 | 回复: 10 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
求解pETDUET-1 原核共表达两个基因一些不懂的地方 已有3人参与
|
||
|
有两个通过pulldown、酵母双杂验证过的两个互作蛋白，现在想在大肠杆菌中共表达这两个蛋白， 第一个问题：是在一个质粒中表达这两个蛋白好（pETDuet-1），还是分别在两个质粒中表达好(pETDuet-1/pACYCDuet-1)？ 第二个问题：假设在一个pETDuet-1共表达两个基因，而只有一个His标签（载体截图在下面），会不会因为结合力弱而只得到一个蛋白（与His直接相连的蛋白与Ni柱结合）另一个蛋白直接就是穿出，得不到互作蛋白啊？ PS: pulldown可以把这两个蛋白拉出来，那His纯化可以依靠结合力拉出来吗？  图片1.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
论文终于录用啦！满足毕业条件了
已经有17人回复
-
不自信的我
已经有5人回复
-
磺酰氟产物，毕不了业了！
已经有4人回复
-
投稿Elsevier的杂志（返修），总是在选择OA和subscription界面被踢皮球
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 换载体，pET21a换成pET32a的酶切位点问题
已经有19人回复
- 同一个基因片段连到两个不同载体，序列就不一样了？
已经有10人回复
- 启动子基因串联问题
已经有11人回复
- 原核表达只能在沉淀中检测出目标蛋白怎么办
已经有9人回复
- 双顺反子 表达载体的构建——求助！
已经有8人回复
- 原核表达载体目的片段终止密码子后出现ATG
已经有12人回复
- 怎样将两个基因共表达？
已经有12人回复
- 蛋白表达不出来，是什么原因造成的
已经有7人回复
- 请教：我的蛋白表达出来了，可溶，但为什么大部分都是没有活性的?
已经有17人回复
- 有谁用过pETDuet-1，交流下
已经有15人回复
- 做共表达，用什么克隆方法比较好呢？
已经有14人回复
- 将两个基因串联到启动子下面，两个基因都能表达么？
已经有54人回复
- 请教高手：转有pACYCDuet-1和pETDuet-1双载体四基因的共表达问题
已经有9人回复
- 关于基因超表达的影响
已经有5人回复
- 共表达载体只表达出一个蛋白
已经有21人回复
- 关于基因构建中开放阅读框架的若干问题
已经有7人回复
- 原核表达形成了包涵体怎么办啊？
已经有22人回复
- 【求助/交流】表达载体pCAMBIA1304表达顺序看不懂
已经有12人回复
- 原核表达菌液裂解
已经有14人回复
4楼2015-08-11 22:23:14
9楼2015-12-10 22:12:40