24小时热门版块排行榜    

查看: 2055  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

linden00

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白上清表达无活性,求复性方法 已有2人参与

我的蛋白在上清中有大量表达,但是做EMSA检测无活性,看文献中是降低盐酸胍浓度来复性的。有没有人做过柱上复性的?想知道具体方法。我是应该直接按包涵体的方法复性还是上清在镍柱纯化的同时复性呢?另外蛋白中有几个半胱氨酸,没有二硫键,是不是一定要加巯基乙醇来保护巯基?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

方便的话,站内给我你的蛋白序列或者文献
行至水穷处,坐看云起时
7楼2015-05-26 19:58:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

viki_MDK

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
纳尼,在上清中不就是可溶的么?  你复性也是为了可溶呀?这不是画蛇添足么。
3楼2015-05-26 15:42:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linden00

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by viki_MDK at 2015-05-26 15:42:07
纳尼,在上清中不就是可溶的么?  你复性也是为了可溶呀?这不是画蛇添足么。

但是上清无活性呀
4楼2015-05-26 17:11:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
linden00: 金币+10 2015-05-27 10:04:33
如果是核酸结合蛋白,有没有考虑到buffer不适当,并不是蛋白没有活性?

比如加入10 mM Mg ++ ,  10 uM Zn ++?
行至水穷处,坐看云起时
5楼2015-05-26 19:28:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 291分工科求调剂 +8 science饿饿 2026-03-01 9/450 2026-03-01 14:22 by Ducount.Y
[考研] 284求调剂 +6 天下熯 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:19 by Ducount.Y
[考研] 0856材料求调剂 +3 麻辣鱿鱼 2026-02-28 3/150 2026-03-01 14:06 by yc258
[考研] 303求调剂 +3 今夏不夏 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:01 by yc258
[考研] 材料化工调剂 +8 今夏不夏 2026-03-01 9/450 2026-03-01 13:25 by yc258
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +4 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 4/200 2026-03-01 13:15 by wang_dand
[考研] 0856化工专硕求调剂 +6 董boxing 2026-03-01 6/300 2026-03-01 12:45 by houyaoxu
[考研] 272求调剂 +5 材紫有化 2026-02-28 5/250 2026-03-01 11:51 by gaoxiaoniuma
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 求调剂 +5 repeatt?t 2026-02-28 5/250 2026-03-01 11:43 by 王伟要上岸啊
[考研] 高分子化学与物理调剂 +5 好好好1233 2026-02-28 9/450 2026-03-01 10:59 by fengyu211
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业,申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
信息提示
请填处理意见