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肖云啄木鸟

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[求助] 重组毕赤酵母分泌表达目的蛋白的问题

目的蛋白由相同的两条链通过二硫键连接组成，单链分子量在15KD。图片中N为非还原，R为还原。经还原后应为相同的两条链，在电泳图上应为一条带。结果却为2条带!
为什么？如何解决？
1. 有关pH、温度、补料、蛋白水解酶抑制剂、维生素等的实验结果是如此；2. 去糖基化后，也是2条带；3. 摇瓶、10L罐也是如此。

重组毕赤酵母分泌表达目的蛋白的问题

15%胶-N.jpg

重组毕赤酵母分泌表达目的蛋白的问题-1

15%胶-R.jpg

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1楼2015-05-21 14:34:06

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dlyxy08

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是不是分泌表达时设计的酶切位点有两个啊！

2楼2015-11-25 19:23:21

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changqiang

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送红花一朵

您好，我最近也想做pichia ,但是相关资料不多，请问能不能发一些protocol给我，先谢了,584223048@qq.com

3楼2016-01-10 00:55:19

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小鱼爱骆驼

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你好，我想问一下你的蛋白是如何去糖基化的呢？能详细说一下吗？或者有个参考文献可以参考一下的！万分感谢~~~

4楼2016-01-22 10:55:00

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lixinlihu

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信号肽没有干掉

发自小木虫Android客户端

5楼2017-10-03 17:33:33

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