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brighten

木虫 (小有名气)

[求助] 求白蛋白在毕赤酵母分泌表达后被蛋白酶降解的解决办法

重组白蛋白在毕赤酵母中分泌表达,但发酵过程中白蛋白被蛋白酶降解,且后续纯化过程降解后的片段与白蛋白不易分开。求发酵过程中抑制蛋白酶活性办法,及纯化过程分离降解片段和白蛋白的办法。
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金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
brighten: 金币+1, 有帮助, 第一个回帖。 2013-06-19 09:24:29
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2013-06-19 14:43:06
你现在用的是什么菌株,怎么确定白蛋白降解了的?  可以考虑那种防蛋白酶敲出了的菌株
believe!
2楼2013-06-19 08:56:36
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brighten

木虫 (小有名气)

SMD1168,纯化后电泳发现有45K的杂带无法去除,在发酵培养时想了很多办法,如降低pH值,加蛋白酶抑制剂等,最终仍然会有,很头疼啊。
3楼2013-06-19 09:23:25
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xiaopeiliang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by brighten at 2013-06-19 09:23:25
SMD1168,纯化后电泳发现有45K的杂带无法去除,在发酵培养时想了很多办法,如降低pH值,加蛋白酶抑制剂等,最终仍然会有,很头疼啊。

深表理解啊,和你遇到的问题一样,还没有想到办法
4楼2013-08-22 16:20:23
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