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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求白蛋白在毕赤酵母分泌表达后被蛋白酶降解的解决办法
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brighten

木虫 (小有名气)

[求助] 求白蛋白在毕赤酵母分泌表达后被蛋白酶降解的解决办法

重组白蛋白在毕赤酵母中分泌表达，但发酵过程中白蛋白被蛋白酶降解，且后续纯化过程降解后的片段与白蛋白不易分开。求发酵过程中抑制蛋白酶活性办法，及纯化过程分离降解片段和白蛋白的办法。
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1楼 2013-06-18 21:35:44
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不再等待

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
brighten: 金币+1, ★有帮助, 第一个回帖。 2013-06-19 09:24:29
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-06-19 14:43:06
你现在用的是什么菌株，怎么确定白蛋白降解了的？  可以考虑那种防蛋白酶敲出了的菌株
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believe！
2楼2013-06-19 08:56:36
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brighten

木虫 (小有名气)
SMD1168，纯化后电泳发现有45K的杂带无法去除，在发酵培养时想了很多办法，如降低pH值，加蛋白酶抑制剂等，最终仍然会有，很头疼啊。
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3楼2013-06-19 09:23:25
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xiaopeiliang

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by brighten at 2013-06-19 09:23:25
SMD1168，纯化后电泳发现有45K的杂带无法去除，在发酵培养时想了很多办法，如降低pH值，加蛋白酶抑制剂等，最终仍然会有，很头疼啊。

深表理解啊，和你遇到的问题一样，还没有想到办法
赞一下 回复此楼
4楼2013-08-22 16:20:23
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