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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助一个10k的pcr问题
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匿名

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zhangyunjing

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1楼 2015-05-12 10:22:54
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zhangyunjing

金虫 (小有名气)
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可以使用长片段扩增试剂盒试试看
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rainwater
5楼2015-05-12 12:40:54
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chrqrq09

铁虫 (初入文坛)
★
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有没有试过用TAKARA的GC Buffer？加入这个buffer可以帮助高GC含量的模板解链，有助于扩增。另外，你还可以提高变性温度，提高到96度试试，这样能促进解链。
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你好
2楼2015-05-12 11:58:42
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匿名

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3楼2015-05-12 12:15:39
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6楼2015-05-12 13:07:38
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
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6楼: Originally posted by 爱六弦的肆贤 at 2015-05-12 13:07:38
。。。。。比如...

我这里有长片段的酶，效果不错，你的模板85%GC含量，很高，引物的设计要求较高，对buffer要进行优化，温度也要摸索
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
7楼2015-05-12 13:52:11
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匿名

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8楼2015-05-12 13:53:32
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9楼2015-05-12 13:57:25
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zhangyunjing

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
6楼: Originally posted by 爱六弦的肆贤 at 2015-05-12 13:07:38
。。。。。比如...

生工的 Long and Accurate PCR Kit，效果挺好的，10 kb的片段很容易就能扩增出来
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rainwater
10楼2015-05-12 14:02:46
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