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[交流]
关于构建基因表达载体，以及基因开放阅读框
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求大神指导！！ 我最近在构建基因表达载体，本来就想着从NCBI上查到目的基因片段，然后通过PCR得到目的片段，再连接到表达载体上构建得到重组质粒，但是查阅文献的时候，却发现很多构建表达载体的话，都会连接的是目的基因的开放阅读框，然后再表达，这点让我很困惑，所以特来开贴求大神指导一二 我想问问，如果我要构建目的基因表达载体，那么我应该 1. PCR目的基因片段连接到表达载体上进行表达即可？ 2. PCR得到目的基因片段的ORF，连接到表达载体上进行表达即可？ 3.将目的片段与其ORF一起克隆到我的表达载体上进行表达？ 到底哪种做法是对的？而且不会影响我的实验结果？哦，忘了说，我是想做过表达的。 |
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