版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (3600)
>虫友互识 (870)
>导师招生 (219)
>文献求助 (218)
>硕博家园 (105)
>休闲灌水 (94)
>考博 (76)
>博后之家 (51)
>基金申请 (45)
>找工作 (38)
>论文投稿 (38)
>招聘信息布告栏 (37)
>公派出国 (36)
>考研 (32)
>教师之家 (30)
>外文书籍求助 (26)

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

monkey_pxs

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 715.9
帖子: 117
在线: 54.4小时
虫号: 3465359

[交流] 关于构建基因表达载体，以及基因开放阅读框

求大神指导！！
我最近在构建基因表达载体，本来就想着从NCBI上查到目的基因片段，然后通过PCR得到目的片段，再连接到表达载体上构建得到重组质粒，但是查阅文献的时候，却发现很多构建表达载体的话，都会连接的是目的基因的开放阅读框，然后再表达，这点让我很困惑，所以特来开贴求大神指导一二
我想问问，如果我要构建目的基因表达载体，那么我应该
1. PCR目的基因片段连接到表达载体上进行表达即可？
2. PCR得到目的基因片段的ORF，连接到表达载体上进行表达即可？
3.将目的片段与其ORF一起克隆到我的表达载体上进行表达？
到底哪种做法是对的？而且不会影响我的实验结果？哦，忘了说，我是想做过表达的。

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

表达载体构建中目的基因的选择已经有7人回复
启动子方向与目的基因方向已经有4人回复
关于真核生物基因载体构建内含子的问题已经有4人回复
有人做过双报告基因的过表达质粒载体么？已经有5人回复
什么方法确定插入目的片段后表达载体的阅读框有无发生变化？已经有9人回复
原核表达载体目的片段终止密码子后出现ATG 已经有12人回复
关于基因异源表达已经有4人回复
表达载体构建的若干问题，谢谢大家。已经有5人回复
为什么扩了一个抗性基因，连到载体上，这个基因没有表达呢，跪求各个大牛指导！！！已经有17人回复
基因缺失的载体构建已经有4人回复
将两个基因串联到启动子下面，两个基因都能表达么？已经有54人回复
目的基因表达载体的构建问题~请指教已经有6人回复
有用同源重组法进行基因克隆和载体构建的吗？已经有8人回复
构建了个基因的表达载体，发现有一个氨基酸发生突变已经有10人回复
关于基因构建中开放阅读框架的若干问题已经有7人回复
构建pBI121表达载体，目的基因与载体连接不上已经有54人回复
【求助/交流】表达载体pCAMBIA1304表达顺序看不懂已经有12人回复
已知基因全长，克隆构建表达载体已经有5人回复
【求助/交流】关于开放阅读框（ORF）的一个问题已经有14人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2015-04-27 16:33:56

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

MolEPI: 2
应助: 682 (博士)
金币: 6507
帖子: 1559
在线: 801.6小时
虫号: 1427240

引用回帖:

22楼: Originally posted by monkey_pxs at 2015-04-27 20:28:47
那如果根据NCBI查得目的片段序列，PCR后连上去是否可以呢？...

你的基因来源什么物种？是否有内含子？做什么类型的表达？原核？真核？植物？

23楼2015-04-27 21:48:42

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 28 个回答

简单回复

假大空3楼

2015-04-27 17:07 回复

monkey_pxs(金币+1): 谢谢参与

jeangong11楼

2015-04-27 17:29 回复

monkey_pxs(金币+1): 谢谢参与

查看全部 28 个回答