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monkey_pxs

金虫 (小有名气)


[交流] 关于构建基因表达载体,以及基因开放阅读框

求大神指导!!
我最近在构建基因表达载体,本来就想着从NCBI上查到目的基因片段,然后通过PCR得到目的片段,再连接到表达载体上构建得到重组质粒,但是查阅文献的时候,却发现很多构建表达载体的话,都会连接的是目的基因的开放阅读框,然后再表达,这点让我很困惑,所以特来开贴求大神指导一二
我想问问,如果我要构建目的基因表达载体,那么我应该
1. PCR目的基因片段连接到表达载体上进行表达即可?
2. PCR得到目的基因片段的ORF,连接到表达载体上进行表达即可?
3.将目的片段与其ORF一起克隆到我的表达载体上进行表达?
到底哪种做法是对的?而且不会影响我的实验结果?哦,忘了说,我是想做过表达的。
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monkey_pxs

金虫 (小有名气)


引用回帖:
23楼: Originally posted by stone2239 at 2015-04-27 21:48:42
你的基因来源什么物种?是否有内含子?做什么类型的表达?原核?真核?植物?...

我的基因来源于原核,不含有内含子,然后是想做目的基因过表达
24楼2015-04-27 21:55:45
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假大空3楼
2015-04-27 17:07   回复  
monkey_pxs(金币+1): 谢谢参与
jeangong11楼
2015-04-27 17:29   回复  
monkey_pxs(金币+1): 谢谢参与
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