24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1193  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

清晨初日

铜虫 (小有名气)

[求助] rt-pcr引物设计问题(新手求助,5555) 已有1人参与

NCBI上面检索到的基因序列,起始密码子前面和终止密码子后面都还有碱基,那我设计上下游引物的时候,是去掉这些碱基从起始密码子开始设计引物,还是应该怎样做?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

学渣逆袭,都闪开
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清晨初日

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by stone2239 at 2015-04-23 13:30:15
对,因为有的时候起始密码子开始的引物用cDNA或DNA做模板扩增时效率低,用UTR区的高效率引物扩出序列连到载体后,以载体质粒为模板扩增效率会高很多。...

这样要合成2条引物岂不是很麻烦?我还是尽量用起始密码子开始对吧?
学渣逆袭,都闪开
7楼2015-04-23 15:54:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
清晨初日: 金币+10 2015-04-23 11:17:41
你的最终目的是要构建表达载体吗?你查到的应该是cDNA序列,起始密码子、终止密码子两侧分别是5‘UTR、3'UTR,如果起始密码子开始的引物特异性、扩增效率很好,那就直接从起始密码子开始,如果不好,也可以在UTR区设计,扩增出来连到T载后,以其为模板再用起始密码子开始的引物扩。
2楼2015-04-22 11:44:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

森林独行者

新虫 (初入文坛)

不需要去除,你选的是CDS区,直接设计就可以
3楼2015-04-23 10:09:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清晨初日

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 森林独行者 at 2015-04-23 10:09:09
不需要去除,你选的是CDS区,直接设计就可以

起始密码子和终止密码子之间才是cds区啊,那我就是从这两个密码子开始?不管前后其他的序列?
学渣逆袭,都闪开
4楼2015-04-23 11:18:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +3 Eujd1 2026-03-31 4/200 2026-03-31 15:14 by syjjj0321
[考研] 材料与化工272求调剂 +24 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 24/1200 2026-03-31 15:02 by xixiangyue6220
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +7 李李不服输 2026-03-25 7/350 2026-03-31 14:57 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿大连理工大学,机械工程学硕,341 +3 西瓜田的守望者 2026-03-30 3/150 2026-03-31 11:08 by asdfzly
[考研] 求调剂 +4 图鉴212 2026-03-30 4/200 2026-03-31 10:20 by cal0306
[考研] 材料学硕333求调剂 +18 北道巷 2026-03-24 18/900 2026-03-31 09:56 by luoyongfeng
[考研] 327求调剂 +5 小卡不卡. 2026-03-29 5/250 2026-03-30 19:30 by Wang200018
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +18 Mr. Z 2026-03-25 19/950 2026-03-30 19:01 by Wang200018
[考研] 26考研-291分-厦门大学(085601)-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +5 min3 2026-03-24 6/300 2026-03-30 18:42 by 544594351
[有机交流] 考研调剂 +8 watb 2026-03-26 8/400 2026-03-30 18:40 by 544594351
[考研] 322求调剂:一志愿湖南大学 材料与化工(085600),已过六级。 +9 XX小邓 2026-03-29 9/450 2026-03-30 17:18 by limeifeng
[考研] 085701求调剂初试286分 +5 secret0328 2026-03-28 5/250 2026-03-30 12:54 by fangnagu
[考研] 考研调剂 +7 小蜡新笔 2026-03-29 7/350 2026-03-29 19:00 by 学员8dgXkO
[考研] 086000生物与医药调剂 +5 Feisty。 2026-03-28 9/450 2026-03-29 12:02 by longlotian
[考研] 343求调剂 +6 爱羁绊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 12:00 by 无际的草原
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 348求调剂 +4 小懒虫不懒了 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:47 by 果果妈咪
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
信息提示
请填处理意见