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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » TaqMan法荧光定量PCR曲线没有平台期是什么原因
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920081341

金虫 (小有名气)

[求助] TaqMan法荧光定量PCR曲线没有平台期是什么原因 已有2人参与

TaqMan法，荧光定量PCR曲线没有平台期只是一直上升，50个循环也试过了 ，基本没什么区别，我附了一张图请各位帮忙分析分析。

TaqMan法荧光定量PCR曲线没有平台期是什么原因
w177h1995106_1429403337_929.jpg
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1楼 2015-04-21 10:43:55
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hmyhjylrm

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
会不会模板CDNA少了啊？虽然我们检测时推荐是不超过10ng，但是我一般都用100ng的。
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生物研究生
2楼2015-04-21 14:40:38
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920081341

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hmyhjylrm at 2015-04-21 14:40:38
会不会模板CDNA少了啊？虽然我们检测时推荐是不超过10ng，但是我一般都用100ng的。

不是啊，已经用高浓度的模板试过了啊，还是这样

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-04-21 15:57:29
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wx26794

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

扩增荧光值很低，扩增曲线没有指数期，PCR扩增效率比较低。扩增效率低可能跟模板质量低有关，看是不是提取的模板里含有PCR抑制物，还可能是是引物设计得不好，引物的扩增效率就低，也有可能是反应体系的问题
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4楼2015-06-03 17:21:16
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