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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 大肠杆菌BL21(DE3)转化，平板上长满了密密麻麻很小的转化子
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

[求助] 大肠杆菌BL21(DE3)转化，平板上长满了密密麻麻很小的转化子 已有2人参与

最近做转化，不管是电转化，还是Cacl2转化，复苏后的菌液取100uL涂板，最后板子上密密麻麻长满了很小的菌落，根本就没办法挑取单菌落，平板上均加了抗生素，50ug/mL和100ug/mL都试过，转化子仍然很多，这是什么原因呢？
     麻烦遇到到同种问题的亲给点意见？
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
1楼 2015-04-10 09:20:21
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能原因两个：抗生素失效，重新配过；感受态细胞污染，重新划线纯化。
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2楼2015-04-10 09:41:28
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
同意楼上，抗生素失效和感受态菌株污染的可能性很大。
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3楼2015-04-10 09:54:07
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上
引用回帖:
3楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2015-04-10 09:54:07
同意楼上，抗生素失效和感受态菌株污染的可能性很大。

哦，感受态细胞时从三个月前划线的平板上挑取的单菌落。考虑到这个原因，重新活化中，，，，
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
4楼2015-04-10 14:49:21
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上
引用回帖:
2楼: Originally posted by lxj341401 at 2015-04-10 09:41:28
可能原因两个：抗生素失效，重新配过；感受态细胞污染，重新划线纯化。

恩，谢谢，纯化中，，，希望一切顺利。抗生素应该正常，因为分别在液体LB中加抗生素和不加抗生素挑取单菌落培养，同样的时间，能看到生物量明显有区别
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
5楼2015-04-10 14:50:34
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