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Earl_zw

铜虫 (小有名气)

[求助] pcp20转化bl21 de3 怎么这么难 已有4人参与

由red系统对bl21 de3 基因组上的基因进行敲除,遇到非常头疼的问题,一开始是pkd46 死活转不进去,用了好多办法,最后终于转进去了并得到了重组子,接下来想把inframe去掉,pcp20又死活转不进去,快崩溃了,,,bl21 de3这么难操作吗?之前同样方法对mg1655基因敲除很快就敲掉了。
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song淡定

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主你的pkd46是用什么方法转进去的?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2014-09-16 21:58:42
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Earl_zw

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by bolysu at 2014-09-18 13:40:22
是啊,我也很想知道你是怎么转进去的啊?我也是一直转不进去,放弃了的...

pcp20最终转进去了,用SOB培养基做的感受态,全部涂板(双抗的)只长了五个克隆,所以你不妨试试SOB培养基做感受态试试
8楼2014-09-22 18:36:02
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普通回帖

小小cool

金虫 (正式写手)

电转么

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-09-07 20:06:09
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Earl_zw

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小小cool at 2014-09-07 20:06:09
电转么

电转化转都试过了 就是转不进去
3楼2014-09-08 18:33:55
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joyceashlay

新虫 (小有名气)

别着急,我也是敲不掉。。
4楼2014-09-15 18:29:44
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bolysu

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

6楼2014-09-18 13:40:22
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Earl_zw

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by song淡定 at 2014-09-16 21:58:42
楼主你的pkd46是用什么方法转进去的?

电转的  也是转了好多次才转进去的
7楼2014-09-22 12:55:21
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小小cool

金虫 (正式写手)

你好,可以交换点pcp20载体吗?我们的pcp20只有amp抗性

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2014-09-22 21:24:09
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视界悲scut

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

转质粒的话,不需要电转的啊,做化转感受态就好了。小量制备化转感受态有takara的试剂盒,很方便,也不贵
10楼2014-10-04 11:14:22
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