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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】制备BL21(DE3)感受态细胞及质粒转化操作步骤
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刘敬功

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】制备BL21(DE3)感受态细胞及质粒转化操作步骤 已有8人参与

制备BL21(DE3)感受态细胞及质粒转化操作步骤
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1楼 2010-04-28 13:05:01
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1): 2010-04-28 14:46
刘敬功(金币+1): 2010-04-28 16:11
感受态细胞的制备，就按照分子克隆介绍的，百分之百没有问题
质粒转化具体要看什么质粒了
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2楼2010-04-28 13:15:37
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shengwufenzi

金虫 (正式写手)
★ ★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1): 2010-04-28 14:46
刘敬功(金币+1): 2010-04-28 16:11
注意整个操作不要离开冰，严格把握热击时间。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-04-28 14:23:53
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
一般的方法和常见的制备方法是一样的，没有什么区别，当然，效率会有所不同～
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4楼2010-04-28 14:52:15
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gaiyf

金虫 (正式写手)
★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
我有制备其他菌感受态的方法
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多看文献，多学知识
5楼2010-04-28 15:25:58
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)
★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
就按分子克隆的步骤做的 短期用没问题的
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6楼2010-04-28 15:27:48
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gaiyf

金虫 (正式写手)
刘敬功(金币+1): 2010-04-28 16:11
你需要的话可以联系我
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多看文献，多学知识
7楼2010-04-28 15:27:56
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
氯化钙法即可，转化用热激法即可
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8楼2010-04-28 15:29:48
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
按照分子克隆手册上的氯化钙做法就可以了。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
9楼2010-04-28 15:34:05
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504775490

金虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
实验室自己制作过，DH5a和BL21感受态，用氯化钙法即可，制备好的感受态可以-70保存。转化一般都是用热击法，没什么问题~~~
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10楼2015-02-08 21:27:24
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