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刘敬功

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】制备BL21(DE3)感受态细胞及质粒转化操作步骤 已有8人参与

制备BL21(DE3)感受态细胞及质粒转化操作步骤
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1): 2010-04-28 14:46
刘敬功(金币+1): 2010-04-28 16:11
感受态细胞的制备,就按照分子克隆介绍的,百分之百没有问题
质粒转化具体要看什么质粒了
2楼2010-04-28 13:15:37
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shengwufenzi

金虫 (正式写手)

★ ★
刘敬功(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1): 2010-04-28 14:46
刘敬功(金币+1): 2010-04-28 16:11
注意整个操作不要离开冰,严格把握热击时间。
3楼2010-04-28 14:23:53
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liyong1981

金虫 (正式写手)



刘敬功(金币+1):谢谢参与
一般的方法和常见的制备方法是一样的,没有什么区别,当然,效率会有所不同~
4楼2010-04-28 14:52:15
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gaiyf

金虫 (正式写手)


刘敬功(金币+1):谢谢参与
我有制备其他菌感受态的方法
多看文献,多学知识
5楼2010-04-28 15:25:58
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)


刘敬功(金币+1):谢谢参与
就按分子克隆的步骤做的 短期用没问题的
6楼2010-04-28 15:27:48
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gaiyf

金虫 (正式写手)

刘敬功(金币+1): 2010-04-28 16:11
你需要的话可以联系我
多看文献,多学知识
7楼2010-04-28 15:27:56
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主


刘敬功(金币+1):谢谢参与
氯化钙法即可,转化用热激法即可
8楼2010-04-28 15:29:48
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


刘敬功(金币+1):谢谢参与
按照分子克隆手册上的氯化钙做法就可以了。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
9楼2010-04-28 15:34:05
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504775490

金虫 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
实验室自己制作过,DH5a和BL21感受态,用氯化钙法即可,制备好的感受态可以-70保存。转化一般都是用热击法,没什么问题~~~
10楼2015-02-08 21:27:24
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