| 查看: 1302 | 回复: 1 | ||||
[交流]
【求助/交流】做过叶绿素法的前辈能不能指点一下
|
|
第一次用叶绿素法测小球藻，有些不懂的地方，还请前辈指点 小球藻样品OD680稀释两倍后是0.4左右 1、采用离心法收集细胞，加了20ml藻液离心，收集到的细胞非常少，请问正常情况是要多少样品离心？ 2、计算叶绿素a含量的公式中提取液体积和过滤培养物体积分别指的是什么？ 用什么工具计量该体积（过滤培养物事指收集到的细胞吗，如果是的话量非常少，怎么准确计量它的体积呢） 附上我预采用的方法 将培养物摇匀,取适量样品加入0. 2～1. 0 g 的碳酸镁悬浮液,转入离心管中,离心10 min (3 500 r/ min) ,去除上清液,收集细胞。 将收集到的细胞,转入匀浆器或研钵,加2～3mL 90 %的丙酮溶液(9 份体积的丙酮加一份体积的蒸馏水配制而成) ,在室温下研磨3 min。 将提取液转入有刻度的具塞离心管中,用约1mL 90 %的丙酮溶液洗匀浆器或研钵,并将洗涤液倒入上述离心管中,如此重复1～2 次,最后定容为10 mL ,离心3 min (3 500～4 000 r/ min) ,静置1～2min ,以上操作均需在暗处进行。 取上层清液,用光径为1 cm 的比色皿在750nm ,669 nm ,645 nm ,630 nm 波长处分别测定它们的光密度。结果如表1～表4 所示。为减少试剂以及操作引起的误差,取按上述过程制备的上清液(无培养物) ,作为比色测定时调节零点的空白对照。此外,为使0. 2 < OD663 < 1 ,应选用不同光径的比色皿或控制稀释度。叶绿素a 、b 和c 分别在663 nm ,645nm ,630 nm 波长处存在吸收峰值。在750 nm 处测得的OD 用于校正浊度。故在计算它们的含量时应对OD 先进行校正,即分别减去OD750 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 微藻实验技术 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有161人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 想考人大金融学博士，请问有人大的前辈可以给我指点一下吗？
已经有12人回复
- 2, 4-二氯-5-硝基嘧啶4-位上氨基（制备2-氯-4-氨基-5-硝基嘧啶），做过的指点一下
已经有18人回复
- 小弟要被延期了--求大家帮帮忙指点一下吧--有什么好方法！！！！
已经有15人回复
- 求助：好多的缩写不知道什么意思，那位选矿的前辈指点一下
已经有12人回复
- 实验室想买一台 princeton 263A 型的恒电位仪，买过的前辈指点一下~~~急啊急
已经有7人回复
- 第一次投稿，请投过Marine Biology的前辈指点一下，50金币
已经有3人回复
- 想在研一就发篇SCI，求各位前辈指点下如何做
已经有22人回复
- 【求助】新虫求助！哪位前辈指点一下用vasp做空位缺陷的流程
已经有7人回复
- 【求助】【求助】哪位前辈能进来指点一下我重结晶过程中哪里出了问题
已经有4人回复
- 【求助】有人分光光度法测过叶绿素a吗
已经有17人回复
2楼2011-11-15 16:28:32
5