24小时热门版块排行榜    

查看: 1487  |  回复: 5

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

[求助] BL21(DE3)表达乳糖酶 已有2人参与

BL21(DE3)可以用来表达乳糖酶吗?文献里大部分都是用这个宿主菌表达的,可是这个菌的LacZ是完整的,不会干扰乳糖酶的表达吗?
PS:表达时将pET28a(+)和pCold I这两个质粒转入作为对照,也是可以测出乳糖酶的酶活的,如果可以表达乳糖酶,最终酶活计算要减掉空载体测出的酶活吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
夏天的普洱茶(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2014-07-01 11:23:58
转:
BL21(DE3) 菌株
该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。
我感觉是不会干扰乳糖酶表达的。
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
2楼2014-07-01 09:50:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-07-01 09:50:45
转:
BL21(DE3) 菌株
该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。
我感觉是不会干扰 ...

这个我也看到了,我的意思是BL21不转化也是能产少量乳糖酶的,这个不会和所表达的酶相互影响吗?
3楼2014-07-01 11:52:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

引用回帖:
3楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2014-07-01 11:52:36
这个我也看到了,我的意思是BL21不转化也是能产少量乳糖酶的,这个不会和所表达的酶相互影响吗?...

我感觉他自身产生的可以忽略不计的,量非常非常少,检测不到基本上
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
4楼2014-07-01 17:10:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
夏天的普洱茶: 金币+17, ★★★★★最佳答案 2014-07-02 09:36:11
大肠杆菌表达宿主,应该都有乳糖酶表达,至于活性高低与否,这个要进行代谢组分析,实在太麻烦了,你计算的时候直接减掉空载体对照应该就行了
显微镜下的世界很精彩!
5楼2014-07-01 21:37:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by asznpb at 2014-07-01 21:37:17
大肠杆菌表达宿主,应该都有乳糖酶表达,至于活性高低与否,这个要进行代谢组分析,实在太麻烦了,你计算的时候直接减掉空载体对照应该就行了

噢,这个样子,谢谢
6楼2014-07-01 21:58:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 夏天的普洱茶 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+5) +11 晴天加油 2026-08-26 12/600 2026-08-28 01:22 by li09465290@
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[教师之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 XLGfUIdOmEAO 2026-08-27 4/200 2026-08-27 22:26 by 3RAFyYXYSwGS
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 04:33 by Ie9AyIAvGbvs
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 02:01 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
信息提示
请填处理意见