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loveskyzhou

铁虫 (正式写手)

[交流] 关于DH5a和BL21的表达问题？？

问一下为什么后者是表达载体而前者是扩增载体，是基因组的表达不同还是添加了不同的基因在基因组？
还有就是用前者表达蛋白可以吗？  即便是小量的。
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1楼 2011-08-12 08:33:32
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
楼主可以查一下蛋白表达的原理，包括不同诱导条件的几种》
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2楼2011-08-12 09:01:26
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w2boluo

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
loveskyzhou(金币+1): 谢谢 2011-08-12 10:54:45
西瓜(金币+2): 看文献很用心哦 2011-08-12 18:11:16
BL21（DE3）基因组中多个T7RNA聚合酶.
前者插入的外源片段往往也有本底表达，确实见过有文献用dh5alpha表达外源蛋白的，还是nature。。
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3楼2011-08-12 09:46:46
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天使托

专家顾问 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+1): 鼓励下 2011-08-12 18:10:43
两者都是大肠杆菌的工程菌，都是改造之后的，用途不一样，前者就是一般的扩增载体的菌，也就是将载体转化进DH5α，载体可以高拷贝复制；而BL21则是进行蛋白表达用的。。。
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4楼2011-08-12 09:58:52
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匿名

用户注销 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
loveskyzhou(金币+1): 非常感谢 2011-08-12 15:55:39
西瓜(金币+4): Good 2011-08-12 18:10:28
本帖仅楼主可见
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5楼2011-08-12 15:50:22
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铅钋锶钇

银虫 (初入文坛)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 很活跃啊，鼓励之 2011-08-24 10:56:25
一般两种菌都可以用来做表达的，很多文献上就是用的DH5a表达的，
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6楼2011-08-24 09:46:13
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longage.gene

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
都能表达，只是个量的问题
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7楼2011-08-24 11:15:39
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雨独步

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
好像是跟质粒在两者中的稳定性有关吧，记不清了。。。
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8楼2011-08-24 14:40:31
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小小技术官

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
只知道 一个适合克隆，一个适合表达，还是从默克蛋白手册上学的。
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9楼2012-10-19 00:11:15
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
作为常用的克隆菌株，DH5α是RecA1缺陷型，减少DNA非特异性重组。而且，它无核酸内切酶I活性，使外源DNA更加稳定。质粒可达高拷贝数，提取的质粒也更纯。此外还以用蓝白斑筛选。
BL21常用做表达是因为它缺失一些蛋白酶活性，可以使目的蛋白在菌体大量表达富集。
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10楼2012-10-19 09:23:26
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