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关于DH5a和BL21的表达问题??
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loveskyzhou
铁虫
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专业: 肿瘤生物治疗
[交流]
关于DH5a和BL21的表达问题??
问一下为什么后者是表达载体而前者是扩增载体,是基因组的表达不同还是添加了不同的基因在基因组?
还有就是用前者表达蛋白可以吗? 即便是小量的。
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1楼
2011-08-12 08:33:32
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cicelyzh
铁杆木虫
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作为常用的克隆菌株,DH5α是RecA1缺陷型,减少DNA非特异性重组。而且,它无核酸内切酶I活性,使外源DNA更加稳定。质粒可达高拷贝数,提取的质粒也更纯。此外还以用蓝白斑筛选。
BL21常用做表达是因为它缺失一些蛋白酶活性,可以使目的蛋白在菌体大量表达富集。
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10楼
2012-10-19 09:23:26
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blackrose8089
铁杆木虫
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专业: 植物学研究的新技术、新方
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小木虫(金币
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楼主可以查一下蛋白表达的原理,包括不同诱导条件的几种》
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jiayoubashaonian
2楼
2011-08-12 09:01:26
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w2boluo
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性别: GG
专业: 植物生殖生物学
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loveskyzhou(金币+1): 谢谢 2011-08-12 10:54:45
西瓜(金币+2): 看文献很用心哦 2011-08-12 18:11:16
BL21(DE3)基因组中多个T7RNA聚合酶.
前者插入的外源片段往往也有本底表达,确实见过有文献用dh5alpha表达外源蛋白的,还是nature。。
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How about the future?
3楼
2011-08-12 09:46:46
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天使托
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T.Shen
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管辖:
微生物
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西瓜(金币+1): 鼓励下 2011-08-12 18:10:43
两者都是大肠杆菌的工程菌,都是改造之后的,用途不一样,前者就是一般的扩增载体的菌,也就是将载体转化进DH5α,载体可以高拷贝复制;而BL21则是进行蛋白表达用的。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼
2011-08-12 09:58:52
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