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szylnl

银虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌 诱导 菌体浓度

各位大侠:
我做的基因工程菌,当时优化的时候为:转接后至OD0.6时,加入IPTG,25℃,4h,现在想做一些放大实验,需要多的菌体。但是如果按照我原来的操作的话,菌体量就会很低,请问各位大侠这个问题怎么解决,如果上发酵罐的话,如何诱导,诱导时间等又有什么具体的细节?
谢谢各位了!!!
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用百分之百的努力去做每件事
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256k

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
szylnl: 回帖置顶 2012-01-02 15:24:36
szylnl(金币+20): ★★★很有帮助 2012-01-02 15:28:51
25度可以过夜诱导。放大的话,IPTG可换成乳糖,只是量上稍多加些。上罐又是一步放大,这是蛋白依赖的,你只能摸最合适。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2011-12-28 22:17:50
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普通回帖

linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-12-28 18:41:14
用1-4L的培养基在三角瓶里养呗    其他的差不多

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2011-12-28 16:36:58
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szylnl

银虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by linyingjia at 2011-12-28 16:36:58:
用1-4L的培养基在三角瓶里养呗    其他的差不多

我现在也是这么做的,但是太费事,而且养大肠太费培养基,LB很贵的啊。做一些优化的时候,要配很多啊
用百分之百的努力去做每件事
3楼2011-12-28 18:39:55
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two

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
哥们儿,不是吧,没有你说的那样吧.什么很贵.我看不懂.很简单吧.我不是灌水.
努力快乐着,但生活本不如意
4楼2011-12-28 19:39:59
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kfsh

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
上发酵罐的问题不太懂,平常都是200ml LB多养几瓶,25℃诱导12个小时
6楼2011-12-30 10:35:15
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣

【答案】应助回帖

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要是上罐你得测一下生长曲线,再确定合适的诱导时机!
dasheng1980
7楼2011-12-30 11:50:55
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣

【答案】应助回帖

诱导剂的剂量和你摇瓶的用量一样即可!
dasheng1980
8楼2011-12-30 11:53:21
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szylnl

银虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by 256k at 2011-12-28 22:17:50:
25度可以过夜诱导。放大的话,IPTG可换成乳糖,只是量上稍多加些。上罐又是一步放大,这是蛋白依赖的,你只能摸最合适。

谢谢 我现在也是真么做了
效果还不错
用百分之百的努力去做每件事
9楼2012-01-02 15:25:23
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