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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 大肠杆菌 诱导 菌体浓度
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szylnl

银虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌 诱导 菌体浓度

各位大侠：
我做的基因工程菌，当时优化的时候为：转接后至OD0.6时，加入IPTG，25℃，4h，现在想做一些放大实验，需要多的菌体。但是如果按照我原来的操作的话，菌体量就会很低，请问各位大侠这个问题怎么解决，如果上发酵罐的话，如何诱导，诱导时间等又有什么具体的细节？
谢谢各位了！！！
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用百分之百的努力去做每件事
1楼 2011-12-28 15:31:38
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回帖置顶 ( 共有1个 )

256k

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
szylnl: 回帖置顶 2012-01-02 15:24:36
szylnl(金币+20): ★★★很有帮助 2012-01-02 15:28:51
25度可以过夜诱导。放大的话，IPTG可换成乳糖，只是量上稍多加些。上罐又是一步放大，这是蛋白依赖的，你只能摸最合适。
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szylnl
5楼2011-12-28 22:17:50
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普通回帖

linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-12-28 18:41:14
用1-4L的培养基在三角瓶里养呗    其他的差不多
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szylnl
2楼2011-12-28 16:36:58
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szylnl

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by linyingjia at 2011-12-28 16:36:58:
用1-4L的培养基在三角瓶里养呗    其他的差不多

我现在也是这么做的，但是太费事，而且养大肠太费培养基，LB很贵的啊。做一些优化的时候，要配很多啊
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用百分之百的努力去做每件事
3楼2011-12-28 18:39:55
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two

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
哥们儿,不是吧,没有你说的那样吧.什么很贵.我看不懂.很简单吧.我不是灌水.
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努力快乐着,但生活本不如意
4楼2011-12-28 19:39:59
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kfsh

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上发酵罐的问题不太懂,平常都是200ml LB多养几瓶,25℃诱导12个小时
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6楼2011-12-30 10:35:15
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要是上罐你得测一下生长曲线，再确定合适的诱导时机！
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dasheng1980
7楼2011-12-30 11:50:55
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣

【答案】应助回帖

诱导剂的剂量和你摇瓶的用量一样即可！
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dasheng1980
8楼2011-12-30 11:53:21
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szylnl

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by 256k at 2011-12-28 22:17:50:
25度可以过夜诱导。放大的话，IPTG可换成乳糖，只是量上稍多加些。上罐又是一步放大，这是蛋白依赖的，你只能摸最合适。

谢谢 我现在也是真么做了
效果还不错
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用百分之百的努力去做每件事
9楼2012-01-02 15:25:23
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