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gylu

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[交流] 【求助/交流】一个细菌破碎问题已有8人参与

我们最近在使用超生破碎细菌经常出现细菌不能破碎的现象，换另外的超声破碎仪还是不能解决，请叫各位是什么原因？谢谢！
我们破碎的细菌是大肠杆菌

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要想得到从没有过的东西，就要做从没有做过的事情

1楼 2011-01-24 20:27:03

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biowandy

木虫 (正式写手)

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引用回帖:

Originally posted by gylu at 2011-01-25 11:01:28:

我不知道是不是我的细菌浓度太高，我的是400ml的菌液回收菌体，然后用50ml的缓冲液悬浮的，功率是200w 2s，间隔3s，我试过破碎30分钟，但还是很混浊。谢谢你的建议，我试一下加大功率试试。

400ml的菌液浓度一点都不高，按说不会这样啊。你把功率调大到300试试。把时间也调长点。另外只有细菌浓度稀，破碎很完全的时候，才会得到那种透明的液体，而大多时候不是完全透明的液体，有点浑，但是绝对不是细菌的那种浑浊。你可以自己感受下。

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5楼2011-01-25 11:11:36

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deblway

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同楼上。。。大概楼主的蛋白包涵体了。。。如果是包涵体的话。。。破碎一天都不可能破清的。。。而且离心后的沉淀有黑色的碳化产物。。。一般这种情况我是离心好菌了后直接放-80，然后拿出来化掉。。反复冻融。。然后加点溶菌酶后开破，根据菌的量决定破碎时间，然后就纯。。试试低温诱导看看吧，能否减少包涵体的形成。。反正上清越多越好咯。。

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海贼王！哥当定了。。。。

8楼2011-05-23 16:44:36

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