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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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gylu

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】一个细菌破碎问题 已有8人参与

我们最近在使用超生破碎细菌经常出现细菌不能破碎的现象,换另外的超声破碎仪还是不能解决,请叫各位是什么原因?谢谢!
我们破碎的细菌是大肠杆菌
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biowandy

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by gylu at 2011-01-25 11:01:28:



我不知道是不是我的细菌浓度太高,我的是400ml的菌液回收菌体,然后用50ml的缓冲液悬浮的,功率是200w 2s,间隔3s,我试过破碎30分钟,但还是很混浊。谢谢你的建议,我试一下加大功率试试。

400ml的菌液  浓度一点都不高, 按说不会这样啊。你把功率调大到300试试。把时间也调长点。  另外只有细菌浓度稀,破碎很完全的时候,才会得到那种透明的液体, 而大多时候不是完全透明的液体,有点浑,但是绝对不是细菌的那种浑浊。你可以自己感受下。
5楼2011-01-25 11:11:36
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deblway

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
同楼上。。。大概楼主的蛋白包涵体了。。。如果是包涵体的话。。。破碎一天都不可能破清的。。。而且离心后的沉淀有黑色的碳化产物。。。一般这种情况我是离心好菌了后直接放-80,然后拿出来化掉。。反复冻融。。然后加点溶菌酶后开破,根据菌的量决定破碎时间,然后就纯。。试试低温诱导看看吧,能否减少包涵体的形成。。反正上清越多越好咯。。
海贼王!哥当定了。。。。
8楼2011-05-23 16:44:36
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普通回帖

su3

银虫 (小有名气)


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是不是频率的问题,你的机器符合细胞破碎的要求么?
2楼2011-01-24 23:46:00
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biowandy

木虫 (正式写手)

★ ★
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rainwander(金币+1): 呵呵,有意思,鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-25 22:43:13
引用回帖:
Originally posted by gylu at 2011-01-24 20:27:03:
我们最近在使用超生破碎细菌经常出现细菌不能破碎的现象,换另外的超声破碎仪还是不能解决,请叫各位是什么原因?谢谢!
我们破碎的细菌是大肠杆菌

功率多大?   时间多久?你说出来,


这世界上练过铁布衫的细菌到目前为止还没出现。



300w,3s, 间隔4s, 12分钟试试,  当然也要看体积,我说的这是50ml的体积,离心管装
3楼2011-01-25 10:53:05
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gylu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by biowandy at 2011-01-25 10:53:05:



功率多大?   时间多久?你说出来,


这世界上练过铁布衫的细菌到目前为止还没出现。



300w,3s, 间隔4s, 12分钟试试,  当然也要看体积,我说的这是50ml的体积,离心管装

我不知道是不是我的细菌浓度太高,我的是400ml的菌液回收菌体,然后用50ml的缓冲液悬浮的,功率是200w 2s,间隔3s,我试过破碎30分钟,但还是很混浊。谢谢你的建议,我试一下加大功率试试。
要想得到从没有过的东西,就要做从没有做过的事情
4楼2011-01-25 11:01:28
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gylu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by gylu at 2011-01-25 11:01:28:



我不知道是不是我的细菌浓度太高,我的是400ml的菌液回收菌体,然后用50ml的缓冲液悬浮的,功率是200w 2s,间隔3s,我试过破碎30分钟,但还是很混浊。谢谢你的建议,我试一下加大功率试试。

好的,谢谢!
要想得到从没有过的东西,就要做从没有做过的事情
6楼2011-01-25 16:26:28
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就爱瞌睡虫

新虫 (初入文坛)


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有的时候包涵体表达的时候就很难破的很清亮
7楼2011-05-23 11:17:03
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lly198784

木虫 (正式写手)


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我们实验室一般采取的是超3s停5s,300W的功率,超声时间根据你的浓度决定。
9楼2011-05-24 15:19:00
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36894256

金虫 (小有名气)


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先说你的菌超声指定可以碎的  实在不行用溶菌酶处理吧 买国药的就行 便宜好用
10楼2011-05-24 17:35:27
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