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adslye

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于超声破碎细菌~~~ 已有13人参与

1。破碎的程序你们一般用什么:超5秒停5秒? 多少轮? 功率呢? 振幅选多少?
2。超声时一定要放在冰上吗?
3。超声仪持续工作时间最好不超过几分钟?
4。超到澄清才OK? 。

这几个问题不知道有人研究过吗?
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reasonspare

木虫 (著名写手)

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dhd997(金币+2):谢谢交流。热心斑斑。 2010-06-23 08:16:41
引用回帖:
Originally posted by xieweitian at 2010-06-22 23:11:18:
这个,要看你的目的是什么啊。如果是提取DNA或RNA,是要放在冰上做的。如果是提取多糖,就不有必要放在冰上。破碎的时间自已掌握,破碎时最好加玻璃破碎珠,这样破碎效果非常好,否则效果比较差。

1。破碎的程序你们一般用什么:超5秒停5秒? 多少轮? 功率呢? 振幅选多少?你可以根据目的不同设定不同的参数,其实你说的后面的什么论,功率 振幅,可以统一为功率。同常10 瓦 99sec, 5-30各循环, 温和剪切。 20 瓦 30 sec。 5-10 中等剪切。 〉50 瓦,不能超过10秒否则,对机子的寿命有影响,我又一次100w,结果把探头打碎了。

2。超声时一定要放在冰上吗?.
这个问题很奇怪,如果你不担心你的样品受热损坏,当然可以不加冰,但是你要明白,超声波所有的剩余功率全部变成热量。通常很快就需要更换冰水,注意一定是冰水,仅仅是冰不行,否则等着你的样品受热.

3。超声仪持续工作时间最好不超过几分钟?

见问题1,通常每次超声间隔30sec. 这样可以连续10-30各循环,如果像你说的间歇5sec,最好不要超过10各循环,而且样品多的时候,最好延长间隔时间。
4。超到澄清才OK?

不知道你说的什么意思。如果你超声的细胞怎么会全部澄清。
大慈大悲观世音救苦救难观世音有求必应观世音普渡众生观世音千手千眼观世音官大敢管观世音无处不在观世音普观普长观世音南无观世音菩萨
5楼2010-06-23 06:21:21
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liouwzh

木虫 (正式写手)

★ ★
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lstt09nk(金币+1):感谢分享经验~~ 2010-06-25 16:00:53
我们实验室大肠破壁一般120W的功率,然后超3秒停3秒,一般400个循环。而且破壁要放在冰上。因为超声时会产生大量的热量,而且普通的冰会很快的融化,所以我们有个诀窍就是将制冰机中制造的冰放在-80度过夜后使用,这样可以避免由于冰很快融化而要不停的更换。
10楼2010-06-25 15:57:38
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普通回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主


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这个超声仪器都有说明书的啊。没有那么思维定势的
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
2楼2010-06-22 20:29:42
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)


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超声的时间和功率你得自己摸索,一定要在冰上。至于超成什么样子的,你可以自己做个片子,镜检一下!
I am not a hero , but I served with heroes!
3楼2010-06-22 20:52:42
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xieweitian

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
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reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-06-23 06:22:13
这个,要看你的目的是什么啊。如果是提取DNA或RNA,是要放在冰上做的。如果是提取多糖,就不有必要放在冰上。破碎的时间自已掌握,破碎时最好加玻璃破碎珠,这样破碎效果非常好,否则效果比较差。
520-1314
4楼2010-06-22 23:11:18
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liyong1981

金虫 (正式写手)



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有说明书的,自己看就行了啊~
6楼2010-06-23 08:20:48
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月月大可

木虫 (著名写手)


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必须冰上,其他的要超声过后离心了看看沉淀才能知道参数选择的是否合适!
7楼2010-06-23 09:43:41
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7570361

木虫 (正式写手)

追梦

看一下文献吧
8楼2010-06-23 09:50:21
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7570361

木虫 (正式写手)

追梦

很多文献介绍过
9楼2010-06-23 09:50:56
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