应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】原核pET系统低温诱导表达菌体浓度太小怎么办？
81/1返回列表
查看: 4473  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

安氏

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】原核pET系统低温诱导表达菌体浓度太小怎么办？ 已有7人参与

最近在做质粒为pET-15b的大肠杆菌低温诱导表达，37℃摇菌2h后加入IPTG,诱导表达6h后，菌体OD只有1左右，有什么办法能提高菌体浓度呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-05-30 09:52:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lstt09nk

铁杆木虫 (职业作家)

小堂
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):辛苦~~~ 2010-05-30 21:22:25
想要提高菌体浓度，你试试，在37度培养的时间再延长一些
还有可以适当的加大接种量呀~~
赞一下(2人) 回复此楼
坚持能无数次改变人生的风景，因为只要路是对的，就不怕远~~~
2楼2010-05-30 13:19:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dujing19841014

铁虫 (小有名气)
你还可以改变一下诱导温度
赞一下 回复此楼
3楼2010-05-30 16:53:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xing1789

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+3):正解 2010-05-30 21:22:46
PET系统诱导时候细菌的OD值是在0.6-0.8的  低温诱导一般都是要过夜的  
加入IPTG 一般是三到六个小时收获
我做IPTG诱导 到之后收获的时候OD值也就一点多 最多的时候能达到2
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-05-30 17:20:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+3):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-30 21:22:54
1、优化培养基配方
2、温度最好在你允许范围内尽量高一些
3、最好是上个小型全自动发酵罐，那样效果会更好！
赞一下(2人) 回复此楼
大家共同交流、共同提高！！！
5楼2010-05-30 20:14:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
IPTG诱导以后细菌大量合成外源蛋白，本身的生长会受影响的，肯定不如不诱导的时候长得快。诱导时间过长有的菌体会崩溃。

菌体浓度低不是问题，关键看最后收集到的表达产物量，而且一般做诱导也就是零点几的OD，诱导剂加入的时机和诱导条件还跟产物的性质有关。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2010-05-30 22:47:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ningxi123456

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
原核表达诱导后不是看菌的浓度多少，菌浓度大了反而不好，在诱导时浓度过大，说明菌主要在繁殖，而用于加工蛋白就相对来说少了
赞一下 回复此楼
7楼2012-03-26 19:22:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

26264716

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
2h太短了吧。。。我1/300接种，5-6h才到0.5左右，然后37度诱导4h
赞一下(1人) 回复此楼
苦，才是人生
8楼2013-05-07 13:15:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 安氏 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 3/150 2026-11-10 01:40 by FChKX8meu1ds
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 4/200 2026-11-10 01:29 by FChKX8meu1ds
[考博] 27博士申请 +3 白白白ly 2026-11-09 3/150 2026-11-09 21:39 by szq0819
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 15/750 2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 08:00 by IhnEQauGmT3K
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-08 23:01 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭