24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1276  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

[求助] BL21(DE3)表达乳糖酶 已有2人参与

BL21(DE3)可以用来表达乳糖酶吗?文献里大部分都是用这个宿主菌表达的,可是这个菌的LacZ是完整的,不会干扰乳糖酶的表达吗?
PS:表达时将pET28a(+)和pCold I这两个质粒转入作为对照,也是可以测出乳糖酶的酶活的,如果可以表达乳糖酶,最终酶活计算要减掉空载体测出的酶活吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
夏天的普洱茶: 金币+17, ★★★★★最佳答案 2014-07-02 09:36:11
大肠杆菌表达宿主,应该都有乳糖酶表达,至于活性高低与否,这个要进行代谢组分析,实在太麻烦了,你计算的时候直接减掉空载体对照应该就行了
显微镜下的世界很精彩!
5楼2014-07-01 21:37:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
夏天的普洱茶(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2014-07-01 11:23:58
转:
BL21(DE3) 菌株
该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。
我感觉是不会干扰乳糖酶表达的。
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
2楼2014-07-01 09:50:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-07-01 09:50:45
转:
BL21(DE3) 菌株
该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。
我感觉是不会干扰 ...

这个我也看到了,我的意思是BL21不转化也是能产少量乳糖酶的,这个不会和所表达的酶相互影响吗?
3楼2014-07-01 11:52:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

引用回帖:
3楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2014-07-01 11:52:36
这个我也看到了,我的意思是BL21不转化也是能产少量乳糖酶的,这个不会和所表达的酶相互影响吗?...

我感觉他自身产生的可以忽略不计的,量非常非常少,检测不到基本上
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
4楼2014-07-01 17:10:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学308分求调剂 +22 你好明天你好 2026-04-07 24/1200 2026-04-11 11:14 by ChemPharm
[考研] 0854调剂 +5 音像店听花鼓戏 2026-04-10 5/250 2026-04-11 10:49 by qingpingzhu
[考研] 087100初试311求调剂 +4 任雅琴 2026-04-09 4/200 2026-04-11 10:33 by zhq0425
[考研] 085410-273求调剂 +6 X1999 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:32 by Delta2012
[考研] 农业管理302分求调剂 +3 xuening1 2026-04-10 3/150 2026-04-11 10:18 by zhq0425
[考研] 080500求调剂 +17 黄宇博 2026-04-06 17/850 2026-04-11 08:36 by zhq0425
[考研] 266求调剂 +29 阳阳哇塞 2026-04-07 29/1450 2026-04-10 16:20 by 高维春
[考研] 求调剂 +16 熊二想上岸 2026-04-04 16/800 2026-04-10 11:24 by may_新宇
[考研] +6 化工专硕323分 2026-04-04 6/300 2026-04-10 10:04 by may_新宇
[考研] 348求调剂 +3 candyyyi 2026-04-09 3/150 2026-04-09 17:20 by 段伟艳
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[硕博家园] 有没有学校材料专业收跨调(一志愿085410) +5 momo(上岸版) 2026-04-06 8/400 2026-04-09 15:07 by only周
[考研] 288求调剂 +15 没有答案_ 2026-04-05 15/750 2026-04-09 10:22 by 5268321
[考研] 求调剂 +7 chenxrlkx 2026-04-05 9/450 2026-04-09 09:04 by wj165256
[考研] 285求调剂 +12 AZMK 2026-04-05 18/900 2026-04-08 20:43 by 逆水乘风
[考研] 315求调剂 +17 欣喜777 2026-04-04 18/900 2026-04-08 13:54 by hangsimei
[考研] 材料工程专业日语生求调剂 +9 111623 2026-04-07 9/450 2026-04-07 23:31 by 一只好果子?
[考研] 一志愿南科大生物学297分,求调剂推荐 +8 Y-yyusx 2026-04-06 9/450 2026-04-07 19:38 by biomichael
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-05 5/250 2026-04-06 15:40 by lin-da
[考研] 298求调剂 +7 manman511 2026-04-05 7/350 2026-04-05 10:29 by 唐沐儿
信息提示
请填处理意见