24小时热门版块排行榜    

查看: 2587  |  回复: 5

酷炫飙车

金虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌BL21转化问题 已有3人参与

采用的载体是PET32a和目的基因的重组质粒。转化后筛选平板上没有出现菌落。但在相同条件下PET32a的空载体转化成功。请问有哪些可能的原因,如何解决?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cauobama

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2014-04-02 22:52:27
测序正确?没有把抗性基因破坏?另外很有可能质粒没有转进去,多做几次试试。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-04-02 09:26:28
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励热心交流! 2014-04-02 22:52:51
PET32a和目的基因的重组质粒?是做的酶切连接吧?注意酶切和连接的效率
相信自己
3楼2014-04-02 09:51:48
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

酷炫飙车

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cauobama at 2014-04-02 09:26:28
测序正确?没有把抗性基因破坏?另外很有可能质粒没有转进去,多做几次试试。

我们的重组质粒转化效率比较低,前面成功过,并且重组质粒经过Amp抗性验证,没有丢失抗性基因。
4楼2014-04-02 10:00:08
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

酷炫飙车

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by l68266152 at 2014-04-02 09:51:48
PET32a和目的基因的重组质粒?是做的酶切连接吧?注意酶切和连接的效率

重组质粒是直接由生物公司合成的。不是由我们实验室构建的。
5楼2014-04-02 10:01:44
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aoaoshch

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
酷炫飙车(dllchina代发): 金币+1, 多多交流 2014-04-08 09:15:13
先把质粒转化克隆用的大肠杆菌,从中重新提取质粒,再转化BL21。

你的外源序列可能对BL21有影响,比如紊乱代谢、致死等。
6楼2014-04-03 09:52:16
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 酷炫飙车 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 我面上完蛋了 +5 且听虎啸 2026-08-20 5/250 2026-08-21 09:48 by climap
[基金申请] 让我中一个面上吧! +10 大萍1987 2026-08-20 12/600 2026-08-21 09:31 by 020100099
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +22 yaoyewhu2008 2026-08-20 24/1200 2026-08-21 07:44 by DanielDDDD
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 科研孤儿太难了 +14 我4大白菜 2026-08-20 15/750 2026-08-20 22:33 by 袁向阳007
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
信息提示
请填处理意见