24小时热门版块排行榜    

查看: 2591  |  回复: 5

酷炫飙车

金虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌BL21转化问题 已有3人参与

采用的载体是PET32a和目的基因的重组质粒。转化后筛选平板上没有出现菌落。但在相同条件下PET32a的空载体转化成功。请问有哪些可能的原因,如何解决?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cauobama

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2014-04-02 22:52:27
测序正确?没有把抗性基因破坏?另外很有可能质粒没有转进去,多做几次试试。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-04-02 09:26:28
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励热心交流! 2014-04-02 22:52:51
PET32a和目的基因的重组质粒?是做的酶切连接吧?注意酶切和连接的效率
相信自己
3楼2014-04-02 09:51:48
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

酷炫飙车

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cauobama at 2014-04-02 09:26:28
测序正确?没有把抗性基因破坏?另外很有可能质粒没有转进去,多做几次试试。

我们的重组质粒转化效率比较低,前面成功过,并且重组质粒经过Amp抗性验证,没有丢失抗性基因。
4楼2014-04-02 10:00:08
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

酷炫飙车

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by l68266152 at 2014-04-02 09:51:48
PET32a和目的基因的重组质粒?是做的酶切连接吧?注意酶切和连接的效率

重组质粒是直接由生物公司合成的。不是由我们实验室构建的。
5楼2014-04-02 10:01:44
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aoaoshch

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
酷炫飙车(dllchina代发): 金币+1, 多多交流 2014-04-08 09:15:13
先把质粒转化克隆用的大肠杆菌,从中重新提取质粒,再转化BL21。

你的外源序列可能对BL21有影响,比如紊乱代谢、致死等。
6楼2014-04-03 09:52:16
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 酷炫飙车 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +7 羊腰板 2026-08-21 7/350 2026-08-21 21:28 by iwuli
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
信息提示
请填处理意见