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洛可可薇薇

铁虫 (小有名气)

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专业: 植物遗传学

[求助] 关于PCR的问题。已有5人参与

各位大神，这是我看文献上的PCR反应程序：95℃预变性15min；共35个循环,94℃变性1min， 55℃退火1min，72℃1min和30s,72℃延伸10min。我想请教下，72℃1min和30s是代表什么意思呢？如果是退火，为什么要强调出来？

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1楼 2015-03-29 12:00:02

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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

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专业: 抗体工程学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
洛可可薇薇(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-03-30 20:48:44

你看的这啥文献啊？预变性15min？没有这么长时间，最多3min不得了啦，不要用15min
延伸分为两步延伸和终延伸。延伸，是以你加入的primer为引物从5‘--->3'合成DNA的互补链, 在循环结束后一般要终止延伸8-10min,这样可以补齐所有DNA链,有些链可能在循环过程中只合成了一半,终止延伸呢,就是提高完整双链DNA的比率