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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 关于PCR的问题。
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洛可可薇薇

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于PCR的问题。 已有5人参与

各位大神，这是我看文献上的PCR反应程序：95℃预变性15min；共35个循环,94℃变性1min， 55℃退火1min，72℃1min和30s,72℃延伸10min。我想请教下，72℃1min和30s是代表什么意思呢？如果是退火，为什么要强调出来？
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1楼 2015-03-29 12:00:02
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洛可可薇薇

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 胡程 at 2015-03-29 12:41:41
你说的是1分钟30秒吧

噢，对，应该是，那请问这是属于退火的步骤吗？
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3楼2015-03-29 13:45:59
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胡程

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你说的是1分钟30秒吧
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做最好的自己
2楼2015-03-29 12:41:41
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xydjlove

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 洛可可薇薇 at 2015-03-29 13:45:59
噢，对，应该是，那请问这是属于退火的步骤吗？...

退火步骤是55℃，后面的1分三十秒是延伸时间，是引物结合到模板后，新链合成的时间。
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活在当下
4楼2015-03-29 21:59:16
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胡程

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 洛可可薇薇 at 2015-03-29 13:45:59
噢，对，应该是，那请问这是属于退火的步骤吗？...

楼下说得对，55退火，72延伸，退火温度一般在50-60度左右，我做的克隆，基因在53℃，祝你成功喽
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做最好的自己
5楼2015-03-30 08:22:25
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