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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 5端race产物着么与载体连接
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qaz139687

新虫 (小有名气)

[求助] 5端race产物着么与载体连接 已有1人参与

5’ race产物是不是要先做一个加A的PCR实验，才能拿来与载体连接，不然是连接不上的？顺便求加A的PCR体系和程序。
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1楼 2015-03-27 11:01:01
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qaz139687

新虫 (小有名气)
5 race是用clonteck的试剂盒做的
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2楼2015-03-27 13:07:43
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墨尔本机器

金虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 2015-03-28 23:26:05
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-03-28 23:26:24
不用的，taq酶会在pcr过程中自动加A，发生在72度延伸十分钟。
所以你直接拿5race产物纯化连接就好。
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3楼2015-03-27 16:14:06
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qaz139687

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 墨尔本机器 at 2015-03-27 16:14:06
不用的，taq酶会在pcr过程中自动加A，发生在72度延伸十分钟。
所以你直接拿5race产物纯化连接就好。

clonteck试剂盒里的高效酶也有这个吗，不是说有些酶是没有的吗
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4楼2015-03-27 16:19:35
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墨尔本机器

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qaz139687: 金币+3, ★★★★★最佳答案 2015-03-28 16:31:37
引用回帖:
4楼: Originally posted by qaz139687 at 2015-03-27 16:19:35
clonteck试剂盒里的高效酶也有这个吗，不是说有些酶是没有的吗...

clonteck试剂盒里也是taqDNA聚合酶，都会加A的
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5楼2015-03-27 16:52:08
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墨尔本机器

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
qaz139687: 金币+2 2015-03-28 16:31:41
不用的，taq酶会在pcr过程中自动加A，发生在72度延伸十分钟。
所以你直接拿5race产物纯化连接就好。
clontech也是taq酶，放心做
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6楼2015-03-27 16:53:42
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