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请问DNA提取的结果这样的原因 已有1人参与
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求助各位，我使用16s rDNA鉴定一株细菌，现在刚进行了第一步，按照某试剂盒说明提取基因组DNA，紫外测得提取的DNA样品，A260/A280为2.22，A260为1.946，核酸浓度为97.3 ng/μL。有几个问题： （1）不是一般A260/A280在1.7-1.9之间是DNA纯度比较高，请问我这个为什么还大于2？是RNA污染吗？ （2）这个结果可以直接用于接下来的PCR吗？ （3）下面照片是样品的峰形图，为什么不是呈现最高峰的那种？ 另（4）接下来PCR的引物是通用引物27F和1492R，但看一些文献里这两个引物还有所差异？ 没接触过分子生物学，希望做过的筒子多度指导，谢了~~  DNA提取结果.jpg |
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3楼2015-05-07 16:34:33
打败番茄炒蛋
新虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
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- 专业: 环境微生物学
【答案】应助回帖
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心悦有天: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-05-07 16:39:13
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-07 22:08:07
心悦有天: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-05-07 16:39:13
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A260/A280和A260/A230是核酸纯度的指示值，纯度好的DNA，在pH7-8.5 下其比值应该在2.0 或2.5，A260 / A280的比值， 用于评估样品的纯度， 因为蛋白的吸收峰是280 nm。 纯净的样品比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。 A230是多肽、芳香基团、苯酚和一些碳氢化合物的吸光度，A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物、多肽、苯酚等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0 。A280是蛋白质的吸光度。 你的A260/A230 是0.29? 这样的话不建议你PCR |
2楼2015-05-07 08:43:18
4楼2015-05-07 20:44:57
baichi121234
禁虫 (职业作家)
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本帖内容被屏蔽 |
5楼2015-05-07 22:12:33
40