应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 如何提高毕赤酵母的表达量
51/1返回列表
查看: 2389  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

坦荡荡2014

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何提高毕赤酵母的表达量 已有2人参与

大家好，我这里有一个问题想请这里的前辈们帮忙解决一下，我们实验室已经将外源蛋白转入毕赤酵母中，外源蛋白的A+T区已经进行了同义密码子的替换，并去除了原有的信号肽，并对密码子和发酵条件进行了优化，一直处于摇瓶表达状态，可是表达量一直很低，该怎么办？上灌会有明显的提高吗，还是要换一种载体呢？我们原来用的载体是pPIC9K~启动子是pAOX1，麻烦有经验的前辈们指教一下~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-03-23 16:33:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjwhl

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-03-24 09:12:51
做实验条件优化是重点，载体最好用几种同时尝试 最终选择出最佳载体，既然现在表达量低，表达条件肯定不是最优的呗，建议进行多条件探索。摇瓶表达量低，上罐也不会有很大提高

楼主，“摇瓶表达量低，上罐也不会有很大提高”是说上罐后，比摇瓶水平下，提高的不会高多少倍呢？一般情况下，不是说会高10-100倍吗
赞一下 回复此楼
7楼2015-04-20 22:11:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

新版西游记

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-03-24 09:17:53
坦荡荡2014: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-03-24 12:57:30
做高拷贝筛选。9k是高拷贝载体，用g418梯度筛选，一般拷贝数高表达量高。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
勇往直前
2楼2015-03-23 20:55:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

坦荡荡2014

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 新版西游记 at 2015-03-23 20:55:01
做高拷贝筛选。9k是高拷贝载体，用g418梯度筛选，一般拷贝数高表达量高。

前期，师姐已经试过把拷贝数提高，可是表达量还是不理想~
赞一下 回复此楼
3楼2015-03-24 08:32:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

坦荡荡2014

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 新版西游记 at 2015-03-23 20:55:01
做高拷贝筛选。9k是高拷贝载体，用g418梯度筛选，一般拷贝数高表达量高。

谢谢你谢谢你的回复，请问还有什么方法可以解决吗？您也是做酵母这块的吗？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-03-24 08:42:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工085600，总分304，本科有两篇sci参与，求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 293求调剂 +12 zjl的号 2026-03-16 17/850 2026-03-22 16:51 by i_cooler
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 333求调剂 +5 87639 2026-03-21 7/350 2026-03-21 19:31 by ColorlessPI
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学学硕080502 337求调剂-一志愿华中科技大学 +4 顺顺顺mr 2026-03-18 5/250 2026-03-21 10:22 by luoyongfeng
[考研] 346求调剂[0856] +4 WayneLim327 2026-03-16 7/350 2026-03-21 04:02 by JourneyLucky
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂，总分315（英一） +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 生物学调剂招人！！！ +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 材料专硕306英一数二 +10 z1z2z3879 2026-03-16 13/650 2026-03-18 14:20 by 007_lilei
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭