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Phoebe.Lee

金虫 (小有名气)

。。。

[求助] 蛋白原核表达已有3人参与

最近在做蛋白质原核表达,目的蛋白80KD ,选用pGEX-4T-1载体、21度 、终浓度0.1mM IPTG 诱导过夜 ,SDS-PAGE发现上清中也有蛋白 ,但是表达量不多
,将得到的上清蛋白和GST beads 孵育  ,蛋白几乎不和GST-beads 结合 。请问是什么原因 ?
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岁月静好
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Phoebe.Lee

金虫 (小有名气)

。。。

引用回帖:
2楼: Originally posted by 781055707 at 2015-03-21 17:26:36
可能只是大小一样,但不是目的蛋白吧。

是说我的蛋白没有表达的意思么?
岁月静好
3楼2015-03-21 17:28:13
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能只是大小一样,但不是目的蛋白吧。
采菊东篱下,悠然见南山。
2楼2015-03-21 17:26:36
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781055707

木虫 (著名写手)

楼主pGEX-4T-1载体可以给我一点吗?我可以给你pet28a质粒和BL21(DE3)的感受态。邮费都我出。
采菊东篱下,悠然见南山。
4楼2015-03-21 17:29:02
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781055707

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Phoebe.Lee at 2015-03-21 17:28:13
是说我的蛋白没有表达的意思么?...

不是,在上清里的可能不是,你的蛋白可能在沉淀里。
采菊东篱下,悠然见南山。
5楼2015-03-21 17:30:01
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