24小时热门版块排行榜    

查看: 625  |  回复: 2

laqiwe

铁虫 (正式写手)

[求助] 关于经典分子生物学实验中用量的问题 已有2人参与

1.质粒试剂盒小提浓度一般为多少?
2.DNA电泳上样量为多少?Marker一般上样多少?
3.质粒双酶切DNA加量多少?
4.连接体系目的DNA和载体质量多少?
5.琼脂凝胶有那些种常见的上样孔,分别能上样多少体积?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白表达纯化鉴定精华

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mosquito9246

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1.质粒试剂盒小提浓度一般为多少?
最近要送样测序,技术那边说 满足150ng/ml就够了,一般我提能提到400~500mg/ml A260/A280 A260/A230 都在2左右

2.DNA电泳上样量为多少?Marker一般上样多少?
看具体是做什么实验,样品梳子规格 最大加样量 0.75 mm9 teeth 15μl ,0.75 mm17 teeth 6.5μl ,1.50 mm9 teeth 30μl ,1.50 mm 17 teeth 13μl,这个是我百度一下找到的,一般实验室的还真没具体查过大小·····就最小的 2μl就够了,mark也2μl。然后中等的梳子10μl mark 5μl 。最大的做胶回收的梳子,一次最多可以加样150 μl ,但是跑胶一般mark 5μl~8μl感觉足够啦。

3.质粒双酶切DNA加量多少?
这个没做过
4.连接体系目的DNA和载体质量多少?
没做过

5.琼脂凝胶有那些种常见的上样孔,分别能上样多少体积?
这个问题基本上第二个回答过啦~看你具体下一步要做什么,普通验证,用小孔 加样2μl就够了。胶回收要多一点,中等梳子加50μl,大梳子加150μl

如果有错误,欢迎纠错啊。
2楼2016-12-27 16:16:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peitaokong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1 目的基因和载体的用量,这个用量是按比例进行的,一般遵循基因要比质粒多。基因和质粒的比在3-10倍之间。在这之间的比例是合适,做连接没有问题。2 一般确定基因和载体连接的用量问题,你可以选择将双酶切后的基因和质粒回收后同体积跑电泳,根据电泳条带的亮度来判断用量,这样做连接很不错。如果用nanodrop测定浓度,会存在一定的偏差,没有跑电泳确定来的直观。
3楼2016-12-27 20:11:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 laqiwe 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研调剂 +6 来好运来来来 2026-03-21 7/350 2026-03-25 22:43 by 418490947
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 261求B区调剂,科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见