24小时热门版块排行榜    

查看: 670  |  回复: 2
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

laqiwe

铁虫 (正式写手)

[求助] 关于经典分子生物学实验中用量的问题 已有2人参与

1.质粒试剂盒小提浓度一般为多少?
2.DNA电泳上样量为多少?Marker一般上样多少?
3.质粒双酶切DNA加量多少?
4.连接体系目的DNA和载体质量多少?
5.琼脂凝胶有那些种常见的上样孔,分别能上样多少体积?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白表达纯化鉴定精华

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peitaokong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1 目的基因和载体的用量,这个用量是按比例进行的,一般遵循基因要比质粒多。基因和质粒的比在3-10倍之间。在这之间的比例是合适,做连接没有问题。2 一般确定基因和载体连接的用量问题,你可以选择将双酶切后的基因和质粒回收后同体积跑电泳,根据电泳条带的亮度来判断用量,这样做连接很不错。如果用nanodrop测定浓度,会存在一定的偏差,没有跑电泳确定来的直观。
3楼2016-12-27 20:11:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

mosquito9246

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1.质粒试剂盒小提浓度一般为多少?
最近要送样测序,技术那边说 满足150ng/ml就够了,一般我提能提到400~500mg/ml A260/A280 A260/A230 都在2左右

2.DNA电泳上样量为多少?Marker一般上样多少?
看具体是做什么实验,样品梳子规格 最大加样量 0.75 mm9 teeth 15μl ,0.75 mm17 teeth 6.5μl ,1.50 mm9 teeth 30μl ,1.50 mm 17 teeth 13μl,这个是我百度一下找到的,一般实验室的还真没具体查过大小·····就最小的 2μl就够了,mark也2μl。然后中等的梳子10μl mark 5μl 。最大的做胶回收的梳子,一次最多可以加样150 μl ,但是跑胶一般mark 5μl~8μl感觉足够啦。

3.质粒双酶切DNA加量多少?
这个没做过
4.连接体系目的DNA和载体质量多少?
没做过

5.琼脂凝胶有那些种常见的上样孔,分别能上样多少体积?
这个问题基本上第二个回答过啦~看你具体下一步要做什么,普通验证,用小孔 加样2μl就够了。胶回收要多一点,中等梳子加50μl,大梳子加150μl

如果有错误,欢迎纠错啊。
2楼2016-12-27 16:16:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 5/250 2026-08-13 16:10 by majunge000
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] FileCode能看出啥? +8 要乐观耀哥 2026-08-10 26/1300 2026-08-13 12:01 by Tide man
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +9 家与远方 2026-08-10 14/700 2026-08-13 09:41 by 臭臭不臭01
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
信息提示
请填处理意见