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在下狒狒

新虫 (初入文坛)

[交流] maker中间有很多不清晰的条带是什么情况 已有6人参与

我跑的胶maker应该是只有六个条带,但是再六个主要的条带之间有很多不是很清晰的条带,想问这个是变性不充分的问题么?延长变性时间是不是会好一点。

maker中间有很多不清晰的条带是什么情况
maker的问题.jpg
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ASWDR

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by ASWDR at 2015-03-01 15:33:26
恩,是的,我们的是有染料的,蓝色液体
...

这么说来,可能是你的maker处理过程有问题导致的。一般跑蛋白质之前,加完染料要沸水浴3分钟,破坏蛋白质空间结构。不过,这种Maker就不知道了

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2015-03-01 15:40:49
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查看全部 16 个回答

在下狒狒

新虫 (初入文坛)

而且跑到低分子量之后的条带就很不清楚了,基本上变成了一团,有什么解决的方法么。
我的方法是上层堆积胶浓度4%,下层分离胶浓度12%。每孔上样量20ul,保证蛋白质浓度在100ug/ml以上。70v跑30min,110v跑90min(但基本上这个时间跑不完,需要大概两个小时)。是不是分离胶跑的电压有点小,时间有点长造成的。
2楼2015-02-28 11:02:08
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十七--十七

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不是时间造成的,具体不清楚。确保maker没有放坏?
3楼2015-02-28 11:05:16
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在下狒狒

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 十七--十七 at 2015-02-28 11:05:16
不是时间造成的,具体不清楚。确保maker没有放坏?

maker是新买分装的,solarbio公司的。
延长电泳的时间不会造成条带模糊么?
4楼2015-02-28 11:39:41
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