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张玉2008金虫 (小有名气)
胖胖鱼
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[求助]
为什么我的maker总是不清晰
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如题，请高手们指导， 我用的TAKARA公司的DL500 DNA Maker，3%琼脂糖凝胶，Tiandz 耐热型SYBR染料3ul，100V，40min，跑出来的MAKER很不清晰，为什么呢？  maker不清晰.jpg  2.jpg |
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重复煮对琼脂糖本身没什么大影响，但是会影响染料。EB的话，可以重复煮一次胶而不必补加EB。Sybr Green的热稳定性没有EB好，如果重复煮胶，需要等胶凉下来再补加。当然如果你是把染料加到样品里，或者跑完胶之后再浸泡到染料里染色，则不存在这个问题。 条带有波浪型，加上你说凝胶速度很快，那就是胶没有均匀凝固了。我们一般是普通微波炉，中高火，两分钟，然后自然冷却15分钟左右就可以加染料了，0.5%~2%的胶都是这样，没问题。你说的半分钟凝固是夸张了些。。。。。 另外，看条带有点糊，可能是焦距没调好，如果仪器上或者控制软件上有“聚焦”、“散焦”的按钮，那就自己调调看，以条带最清晰、最锐利为宜。 |
24楼2012-10-21 11:34:52
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