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11楼2012-10-19 09:03:08

linxt2005

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应该是没有琼脂糖没有溶解好的原因，以前我也遇到过这样的问题，仔细处理好倒胶一步后就解决了，楼主还是要尝试一下，方法如楼上战友讲的那样，不要单纯依靠时间和火力来判断。

小兵一个

12楼2012-10-19 09:47:27

review

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应该是胶的问题，没摇匀。可能是你倒胶时，胶太凉了。没用旧胶吧？

交流

13楼2012-10-19 11:50:18

sk_xia0v

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我感觉应该是胶太硬(密度有点大），跑的慢然后电泳有点容易出现波浪状。可以让跑胶时间缩短一些。还有就是电泳槽里面的电极条看看是不是有点偏离或者沾有东西。

14楼2012-10-19 11:57:11

liuguilin

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胶太硬，孔径小，琼脂糖加多了。

15楼2012-10-19 12:49:56

张玉2008

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引用回帖:

13楼: Originally posted by review at 2012-10-19 11:50:18
应该是胶的问题，没摇匀。可能是你倒胶时，胶太凉了。没用旧胶吧？

没有用旧的，但是我是发现我的胶凝的特别快

1.2g凝胶粉+40ml 0.5*TBE

一辈子不长，对自己好点

16楼2012-10-19 13:46:52

张玉2008

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引用回帖:

11楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-19 09:03:08
不会是琼脂糖质量问题吧。重煮应该没问题的。煮好后冷却到40多度的时候加EB到胶。...

琼脂糖是新买的，西班牙产

一辈子不长，对自己好点

17楼2012-10-19 13:48:19

cicelyzh

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你想分多大的片段啊，需要做3%的琼脂糖胶？太小的片段干脆跑PAGE胶了。

18楼2012-10-19 14:42:35

张玉2008

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引用回帖:

18楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-19 14:42:35
你想分多大的片段啊，需要做3%的琼脂糖胶？太小的片段干脆跑PAGE胶了。

我的片段是200bp-300bp

一辈子不长，对自己好点

19楼2012-10-19 15:49:47

cicelyzh

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张玉2008: 金币+2, ★有帮助, 3Q 2012-10-20 16:00:09

引用回帖:

19楼: Originally posted by 张玉2008 at 2012-10-19 15:49:47
我的片段是200bp-300bp...

用1.5-2%的胶就行了，从来没上过3%的。

20楼2012-10-20 06:29:55