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张玉2008

金虫 (小有名气)

胖胖鱼
引用回帖:
20楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-20 06:29:55
用1.5-2%的胶就行了，从来没上过3%的。...

恩，我打算下一步做2%的胶试试
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一辈子不长，对自己好点
21楼2012-10-20 15:59:58
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hourl11

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
22楼2012-10-20 20:09:10
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王文钊-

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以煮30秒就拿出来晃动一下，让它煮的均匀一些，煮的时间太长了个人感觉也不好，胶孔会很软，不好点样。完全融了就好，对着光看没有小颗粒。跑胶的时候电压第一点，跑出来的条带会比较好看。再就是看看 loading buffer 有没有问题。
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23楼2012-10-21 10:39:06
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
张玉2008: 金币+3, ★★★很有帮助, 非常感谢 2012-10-21 13:10:29
张玉2008: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-01-21 16:06:46
重复煮对琼脂糖本身没什么大影响，但是会影响染料。EB的话，可以重复煮一次胶而不必补加EB。Sybr Green的热稳定性没有EB好，如果重复煮胶，需要等胶凉下来再补加。当然如果你是把染料加到样品里，或者跑完胶之后再浸泡到染料里染色，则不存在这个问题。

条带有波浪型，加上你说凝胶速度很快，那就是胶没有均匀凝固了。我们一般是普通微波炉，中高火，两分钟，然后自然冷却15分钟左右就可以加染料了，0.5%~2%的胶都是这样，没问题。你说的半分钟凝固是夸张了些。。。。。

另外，看条带有点糊，可能是焦距没调好，如果仪器上或者控制软件上有“聚焦”、“散焦”的按钮，那就自己调调看，以条带最清晰、最锐利为宜。
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24楼2012-10-21 11:34:52
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mxdong12

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

是不是加水补水以后没有再升温？
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25楼2012-10-21 11:57:23
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