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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 凝胶电泳图像一直不清晰而且DNA片段无显示呢
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muziqiao

新虫 (初入文坛)

[交流] 凝胶电泳图像一直不清晰而且DNA片段无显示呢已有1人参与

请各位同学帮忙分析下，我做了几次凝胶电泳，为什么上图片段一直不清晰呢。而且下图中所用引物是扩增DNA片段大于1000bp的，怎么没有呢，上下图为同一PCR产物，不同的引物。
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    • 2013-08-14 20:57:23, 4.81 M

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1楼2013-08-14 20:56:33
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xwchen24

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-26 18:37:41
这应该是引物的特异性的问题，没有条带是引物扩不出你的目的条带，很亮的是引物二聚体。换引物吧。
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2楼2013-08-14 21:01:52
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muziqiao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xwchen24 at 2013-08-14 21:01:52
这应该是引物的特异性的问题，没有条带是引物扩不出你的目的条带，很亮的是引物二聚体。换引物吧。

谢谢，我的是土壤样品总DNA的提取，开始用的是上面图片的引物，但是前6个样品一直无目的条带，尝试了换下面图片的引物，已经P了好几次了，哪个引物都不理想。
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3楼2013-08-14 21:09:16
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xwchen24

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by muziqiao at 2013-08-14 21:09:16
谢谢，我的是土壤样品总DNA的提取，开始用的是上面图片的引物，但是前6个样品一直无目的条带，尝试了换下面图片的引物，已经P了好几次了，哪个引物都不理想。...

你可以考虑换个模板，或者尝试touch-down PCR,
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4楼2013-08-14 22:41:59
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muziqiao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xwchen24 at 2013-08-14 22:41:59
你可以考虑换个模板，或者尝试touch-down PCR,...

那我可以尝试下，谢谢啦。
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5楼2013-08-26 16:06:55
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