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ghqiu09

禁虫 (正式写手)

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sdhxwp

金虫 (小有名气)

会不会有噬菌体

[ 发自小木虫客户端 ]
卧看满天云不动,一抹长风万里空。
2楼2015-02-26 18:14:33
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jingquan

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.仔细看分子克隆第二版中的步骤。
2.确定质粒松弛型严谨型,按照标准加入对应的氨苄或卡那的量,这在分子克隆书的后面有说明。
3.加入氨苄或卡那,用移液器吸取时,吹吸几次,确保在LB中。
4.用试管摇菌,倾斜角度要达到,否则转速低时,菌在液体中呈现静止的状态,菌、氨苄或卡那接触不到也达不到要求的。
5.平板上长出的菌落先划线,鉴定正确后,从线上挑取再接入液体中,虽然费事,但是降低了不确定因素。之后再分析上述原因。
祝好。
3楼2015-02-27 00:28:42
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jingquan

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

另外,DH5a的菌落要大。JM109的菌落要小,板上都需要16小时左右,所以挑取后摇菌需要增加转速,延长时间。但是时间过长,易出现卫星菌落,挑菌要把握时间。
4楼2015-02-27 00:32:31
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ghqiu09

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

5楼2015-02-28 09:43:48
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jingquan

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by ghqiu09 at 2015-02-28 09:43:48
首先十分感谢,1--4都应该不会是本质原因,第五个鉴定正确??你意思是送测序???...

PCR扩增检测,双酶切检测,测序也可
6楼2015-02-28 16:07:50
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