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wwwpengcs铜虫 (初入文坛)
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我的JM109-pKD46质粒的电击感受态转化效率怎么一直都提不上去呢 已有3人参与
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| 大家好，我最近在做JM109菌株的敲除实验，JM109内导入了一个pKD46质粒，用10%的甘油洗了两次。制作感受态的一些基本方面都注意到了，因为我之前做了很多电击与热击的感受态，热击的感受态转化效率一直都非常高。我检测我的感受态的转化率是直接导入了一个与pKD46（氨苄抗性）质粒兼容的pET-30a(卡纳抗性）质粒，用双抗板来检测。但是每次导入pET-30a质粒后，双抗板上要么是没有长出菌，要么是染了少许杂菌。pKD46质粒的复制子是R101，pET-30a的复制子是pBR322。可以肯定的是，这两个质粒是完全可以兼容的。做了一年，实验卡在这了，求知道的高手能够帮我好心解答一下下~~~（金币不多额，因为这是注册3年来在虫虫上发的第一个帖） |
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2楼2014-08-25 16:11:27
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