| 查看: 2597 | 回复: 6 | |||
wwwpengcs铜虫 (初入文坛)
|
[求助]
我的JM109-pKD46质粒的电击感受态转化效率怎么一直都提不上去呢 已有3人参与
|
| 大家好，我最近在做JM109菌株的敲除实验，JM109内导入了一个pKD46质粒，用10%的甘油洗了两次。制作感受态的一些基本方面都注意到了，因为我之前做了很多电击与热击的感受态，热击的感受态转化效率一直都非常高。我检测我的感受态的转化率是直接导入了一个与pKD46（氨苄抗性）质粒兼容的pET-30a(卡纳抗性）质粒，用双抗板来检测。但是每次导入pET-30a质粒后，双抗板上要么是没有长出菌，要么是染了少许杂菌。pKD46质粒的复制子是R101，pET-30a的复制子是pBR322。可以肯定的是，这两个质粒是完全可以兼容的。做了一年，实验卡在这了，求知道的高手能够帮我好心解答一下下~~~（金币不多额，因为这是注册3年来在虫虫上发的第一个帖） |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有65人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有1人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 我做质粒扩增诱变pcr 结果正确，但是转化进入感受态不长菌，为何？
已经有3人回复
- 用试剂盒通过全质粒PCR来做定点突变，导入不了感受态细胞，请帮我走出困境！
已经有8人回复
- 大质粒转化 感受态细胞问题
已经有23人回复
- 能不能用电击感受态细胞制备热激感受态？
已经有4人回复
- 关于质粒扩增和感受态转化
已经有5人回复
- 转化感受态后提取质粒，测浓度总是很低
已经有17人回复
- 求助：质粒为什么转化感受态转不进去
已经有11人回复
- 感受态细胞提取的质粒酶解后为什么带型不一样？
已经有12人回复
- 【求助/交流】没有转化过的感受态DH5a中含有质粒吗？
已经有15人回复
- 【求助/交流】质粒的转化体积为什么不能超过感受态的十分之一
已经有16人回复
- 【求助/交流】质粒转化枯草杆菌感受态原理
已经有4人回复
感谢参与，应助指数 +1
|
本帖内容被屏蔽 |
2楼2014-08-25 16:11:27
wwwpengcs
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 224.6
- 帖子: 12
- 在线: 8.2小时
- 虫号: 1394477
- 注册: 2011-09-08
- 性别: GG
- 专业: 泌尿系统损伤与修复
3楼2014-08-25 21:01:22
张凡云
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 13418.7
- 散金: 3094
- 红花: 13
- 帖子: 4110
- 在线: 1485.3小时
- 虫号: 2426111
- 注册: 2013-04-19
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2015-02-03 00:46:45
浅语8905
新虫 (小有名气)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 436.1
- 帖子: 125
- 在线: 34小时
- 虫号: 3438071
- 注册: 2014-09-24
- 性别: MM
- 专业: 微生物遗传育种学
5楼2015-02-03 09:25:04
wwwpengcs
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 224.6
- 帖子: 12
- 在线: 8.2小时
- 虫号: 1394477
- 注册: 2011-09-08
- 性别: GG
- 专业: 泌尿系统损伤与修复
6楼2015-02-05 00:11:55
wwwpengcs
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 224.6
- 帖子: 12
- 在线: 8.2小时
- 虫号: 1394477
- 注册: 2011-09-08
- 性别: GG
- 专业: 泌尿系统损伤与修复
7楼2015-02-05 00:12:57
