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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 发酵菌种正常，发酵时出问题
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cresty

新虫 (初入文坛)

[求助] 发酵菌种正常，发酵时出问题 已有6人参与

最近做发酵，遇到个问题无奈啊，做20L大肠杆菌高密度发酵，发酵前检查菌种都没有问题，但是发酵后发现得到的菌不是我要的，密度很低，发酵过程中溶氧开始正常，之后升高降不下去，镜检菌株形态没问题，铺板没见噬菌体，电泳检查没有目的蛋白表达，发酵了几次时好时坏，发酵的菌是甘油菌化板挑形态正常单菌落做种子，验证过蛋白表达正常。怀疑过空气系统带入杂菌，检查清洗过，后来发酵几次也是时好时坏
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1楼 2015-02-04 22:08:41
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cresty

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by haoyu725527 at 2015-02-06 10:13:19
1、培养基培养后状态什么样子？明显浑浊有异味肯定是染杂菌了，是这个问题的话那要从接种液开始着手，整体重新把关一下
2、灭菌温度可以调到121，时间20-30试试

发酵液没有没有明显异味，你说的浑浊是什么意思，培养基培养后本来就是浑的，发酵种子肯定不会有问题，每次发酵种子我都是分出一些检验的
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8楼2015-02-06 19:04:16
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特异性免疫

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励热心应助！ 2015-02-06 15:09:35
你是罐发酵的么，培养基消的时间够不够，染的是什么菌，罐子有没有渗漏，染得菌比需要的菌还多？
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2楼2015-02-04 23:00:59
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cresty

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 特异性免疫 at 2015-02-04 23:00:59
你是罐发酵的么，培养基消的时间够不够，染的是什么菌，罐子有没有渗漏，染得菌比需要的菌还多？

罐发酵，灭菌115度以上30nin，染的具体是什么菌还不清楚，发酵罐应该是不会漏的，镜检看形态像是大肠杆菌但是电泳几乎没有蛋白表达
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3楼2015-02-04 23:12:17
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小花木兰

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也有同样问题，原因一直找不到，就是遥瓶有蛋白，一到罐上就无蛋白。
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4楼2015-02-05 20:04:16
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