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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 发酵罐新染菌问题
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chenweilala

金虫 (小有名气)

[求助] 发酵罐新染菌问题

本人现在在用100L发酵罐中试，罐子是上海敖中生产的，新的，质量应该没有问题，可是，到现在，已发酵两批，每次都是在发酵后期染菌（注意：是后期染菌），经分析，应该不会是灭菌时死角没灭彻底，也应该不可能是接种时染菌，因为这两种情况下染菌时，都是初始就染菌。再后来怀疑是空气过滤器的滤芯有问题，还可各位英雄好汉给点建设性意见，本人不胜感激！！！！！
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1楼 2012-07-07 09:11:25
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回帖置顶 ( 共有1个 )

小小逍遥人

金虫 (正式写手)

张斌猪

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
chenweilala: 金币+4 2012-07-07 18:40:52
amisking: 回帖置顶 2012-07-07 20:32:25
染菌中最怕的是噬菌体，我建议你还是在补料，空气，补料设备上狠狠地查，测一下这些中有没污染，是什么菌，微生物数量（建议用ATP荧光检测仪）   这个不排除一开始就污染了，或者你的菌种本来就已经出现问题了（在活菌过程中）       看来你要辛苦一段时间了
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生命还需要奇迹来衬托
10楼2012-07-07 15:29:08
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yinxue

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
chenweilala: 金币+3 2012-07-07 11:11:14
zhang8826857: 金币+1, 欢迎来微生物板块交流哦^_^ 2012-07-08 19:41:28
我觉得楼应该从以下几个方面入手检查一下：
1.将染菌发酵液镜检，看是染得什么菌。
2.接种的菌液是否污染。
3.接种液没有污染的话，在培养的过程中定时检测有没有污染。
4.如果你说是后期染菌，我觉得你还要确定一下。每天从发酵罐接出200ml放三角瓶中培养作对照，看是那天开始污染。
5.我个人的意见，接种时如果没有染菌并且菌液无污染，那肯定是空气滤芯有问题了，不知道你发酵的是什么菌，污染的是什么菌，你说的后期染菌，很可能是污染的杂菌因为不是优势菌种，所以才在后期表现出来。
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3楼2012-07-07 09:44:45
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飞不过那片海

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
chenweilala: 金币+1 2012-07-07 11:03:21
后期染菌，无非是空气系统、补料和设备问题，一项一项查吧，做发酵最头疼是染菌，有时候染得莫名其妙
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2楼2012-07-07 09:41:57
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flightty

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
chenweilala: 金币+2 2012-07-07 11:10:03
楼主染的是什么菌，芽孢的话是有死角，杆菌或者球菌应该是系统有漏的地方，不过新罐刚刚安装肯定要染几个罐的。
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4楼2012-07-07 10:32:00
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chenweilala

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 小小逍遥人 at 2012-07-07 15:29:08
染菌中最怕的是噬菌体，我建议你还是在补料，空气，补料设备上狠狠地查，测一下这些中有没污染，是什么菌，微生物数量（建议用ATP荧光检测仪）   这个不排除一开始就污染了，或者你的菌种本来就已经出现问题了（在活 ...

我昨天镜检了下菌种液，发现菌种竟然染菌了，而且，发酵液中的细菌就是菌种液中的细菌，顿时崩溃！！！！！
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17楼2012-07-09 11:37:37
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普通回帖

chenweilala

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞不过那片海 at 2012-07-07 09:41:57
后期染菌，无非是空气系统、补料和设备问题，一项一项查吧，做发酵最头疼是染菌，有时候染得莫名其妙

是的，最让人头疼的就是染菌！！！
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5楼2012-07-07 11:01:31
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chenweilala

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by flightty at 2012-07-07 10:32:00
楼主染的是什么菌，芽孢的话是有死角，杆菌或者球菌应该是系统有漏的地方，不过新罐刚刚安装肯定要染几个罐的。

菌比较杂，总感觉既有芽孢又有球菌，那岂不是很严重？！！！！
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6楼2012-07-07 11:10:53
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chenweilala

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yinxue at 2012-07-07 09:44:45
我觉得楼应该从以下几个方面入手检查一下：
1.将染菌发酵液镜检，看是染得什么菌。
2.接种的菌液是否污染。
3.接种液没有污染的话，在培养的过程中定时检测有没有污染。
4.如果你说是后期染菌，我觉得你还要确定 ...

染菌直接影响试验进度，而且解决染菌问题后，路还很长，纠结.......
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7楼2012-07-07 11:17:00
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以先用LB肉汤培养基（可以用工业级的自己配）做个无菌检查，看看罐系统有没有问题，如果罐的系统没问题再考虑接种、补料等其它的原因。
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8楼2012-07-07 11:20:58
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陈年芬芳

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 欢迎来微生物板块交流哦^_^ 2012-07-08 19:41:36
我觉得多是补料或者空气滤芯的问题，楼上的也都说了一些，优势菌的问题可能也是一方面，这个接种子摇瓶培养就可以确定。具体是什么问题还需要确定在整个发酵工艺中哪一步染菌的，后期太过于笼统，这样有助于排除很多问题。个人意见，仅供参考。
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9楼2012-07-07 12:36:39
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