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chenweilala

金虫 (小有名气)

[求助] 发酵罐新染菌问题

本人现在在用100L发酵罐中试,罐子是上海敖中生产的,新的,质量应该没有问题,可是,到现在,已发酵两批,每次都是在发酵后期染菌(注意:是后期染菌),经分析,应该不会是灭菌时死角没灭彻底,也应该不可能是接种时染菌,因为这两种情况下染菌时,都是初始就染菌。再后来怀疑是空气过滤器的滤芯有问题,还可各位英雄好汉给点建设性意见,本人不胜感激!!!!!
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yinxue

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chenweilala: 金币+3 2012-07-07 11:11:14
zhang8826857: 金币+1, 欢迎来微生物板块交流哦^_^ 2012-07-08 19:41:28
我觉得楼应该从以下几个方面入手检查一下:
1.将染菌发酵液镜检,看是染得什么菌。
2.接种的菌液是否污染。
3.接种液没有污染的话,在培养的过程中定时检测有没有污染。
4.如果你说是后期染菌,我觉得你还要确定一下。每天从发酵罐接出200ml放三角瓶中培养作对照,看是那天开始污染。
5.我个人的意见,接种时如果没有染菌并且菌液无污染,那肯定是空气滤芯有问题了,不知道你发酵的是什么菌,污染的是什么菌,你说的后期染菌,很可能是污染的杂菌因为不是优势菌种,所以才在后期表现出来。
3楼2012-07-07 09:44:45
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飞不过那片海

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
chenweilala: 金币+1 2012-07-07 11:03:21
后期染菌,无非是空气系统、补料和设备问题,一项一项查吧,做发酵最头疼是染菌,有时候染得莫名其妙
2楼2012-07-07 09:41:57
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flightty

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chenweilala: 金币+2 2012-07-07 11:10:03
楼主染的是什么菌,芽孢的话是有死角,杆菌或者球菌应该是系统有漏的地方,不过新罐刚刚安装肯定要染几个罐的。
4楼2012-07-07 10:32:00
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chenweilala

金虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 小小逍遥人 at 2012-07-07 15:29:08
染菌中最怕的是噬菌体,我建议你还是在补料,空气,补料设备上狠狠地查,测一下这些中有没污染,是什么菌,微生物数量(建议用ATP荧光检测仪)   这个不排除一开始就污染了,或者你的菌种本来就已经出现问题了(在活 ...

我昨天镜检了下菌种液,发现菌种竟然染菌了,而且,发酵液中的细菌就是菌种液中的细菌,顿时崩溃!!!!!
17楼2012-07-09 11:37:37
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普通回帖

chenweilala

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞不过那片海 at 2012-07-07 09:41:57
后期染菌,无非是空气系统、补料和设备问题,一项一项查吧,做发酵最头疼是染菌,有时候染得莫名其妙

是的,最让人头疼的就是染菌!!!
5楼2012-07-07 11:01:31
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chenweilala

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by flightty at 2012-07-07 10:32:00
楼主染的是什么菌,芽孢的话是有死角,杆菌或者球菌应该是系统有漏的地方,不过新罐刚刚安装肯定要染几个罐的。

菌比较杂,总感觉既有芽孢又有球菌,那岂不是很严重?!!!!
6楼2012-07-07 11:10:53
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chenweilala

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yinxue at 2012-07-07 09:44:45
我觉得楼应该从以下几个方面入手检查一下:
1.将染菌发酵液镜检,看是染得什么菌。
2.接种的菌液是否污染。
3.接种液没有污染的话,在培养的过程中定时检测有没有污染。
4.如果你说是后期染菌,我觉得你还要确定 ...

染菌直接影响试验进度,而且解决染菌问题后,路还很长,纠结.......
7楼2012-07-07 11:17:00
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以先用LB肉汤培养基(可以用工业级的自己配)做个无菌检查,看看罐系统有没有问题,如果罐的系统没问题再考虑接种、补料等其它的原因。
8楼2012-07-07 11:20:58
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陈年芬芳

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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zhang8826857: 金币+1, 欢迎来微生物板块交流哦^_^ 2012-07-08 19:41:36
我觉得多是补料或者空气滤芯的问题,楼上的也都说了一些,优势菌的问题可能也是一方面,这个接种子摇瓶培养就可以确定。具体是什么问题还需要确定在整个发酵工艺中哪一步染菌的,后期太过于笼统,这样有助于排除很多问题。个人意见,仅供参考。
9楼2012-07-07 12:36:39
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小小逍遥人

金虫 (正式写手)

张斌猪

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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chenweilala: 金币+4 2012-07-07 18:40:52
amisking: 回帖置顶 2012-07-07 20:32:25
染菌中最怕的是噬菌体,我建议你还是在补料,空气,补料设备上狠狠地查,测一下这些中有没污染,是什么菌,微生物数量(建议用ATP荧光检测仪)   这个不排除一开始就污染了,或者你的菌种本来就已经出现问题了(在活菌过程中)       看来你要辛苦一段时间了
生命还需要奇迹来衬托
10楼2012-07-07 15:29:08
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