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【求助/交流】不产孢的真菌如何计算接种量
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| 想利用摇瓶发酵获取真菌代谢物的最佳发酵条件，但目标菌非产孢真菌，如何确定接种量！ |
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厉娜
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木薯淀粉液化醪的成分也是挺复杂的，是由木薯淀粉粉碎之后过筛、调浆、加入耐高温alpha淀粉酶、高温蒸煮而得。耐高温alpha淀粉酶是由芽孢杆菌所产，最适作用温度超过90度，不是生淀粉酶，不能降解生淀粉。木薯生淀粉晶体在50度开始被破坏，随着温度升高，糊化速度加快，同时耐高温alpha淀粉酶活力上升。在蒸煮的过程中酶逐渐失活，最终得到液化醪。液化醪主要含有的糖的成分随淀粉酶的降解程度而异，在酒精生产中的液化醪主要含有麦芽寡糖、麦芽糖和少量葡萄糖。木薯淀粉的淀粉含量随木薯品种和季节而异，鲜木薯含量一般为30%，干品（约含10%水分）一般为70%甚至更高，剩下的都是纤维素木质素之类的不能利用的东西。离心也是可行的，但是有两个问题要注意： 1、会把一部分糖分也去掉，但是由于糖分都已经是可溶解了，所以去掉的不多 2、在中试的时候难操作，量多难操作，中试的发酵罐可能会有50升甚至两百升，需要的液化醪较多。 好处也是有的，可以测定生物量。生物量是一项辅助数据，可以获得就最好也获得，可以看看产量的变化是否因为生物量的变化引起的。但是凡事都应该以产量为唯一可比较的指标。还有一个好处是方便产物的提取，渣多不好提取，但是如果只是优化一下实验条件又不用提取的，就别考虑这么多了。 所以我觉得离心是最好的，有的东西离心去不掉，就过滤。但是如果要求不高，那就算了。 |
16楼2011-04-28 14:59:38
17楼2011-04-28 15:18:10
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18楼2011-04-28 15:21:12
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不产孢子的丝状真菌...第一次听说，LZ能具体说下么... LZ的问题是不是其实有两个 1：接种量无法确定的问题. 2：发酵过程中测菌体重量的问题 接种量的问题，其实要看LZ要求的精度有多高了。要是不高的话，个人觉得打饼就可以了，称重感觉比较容易染菌。 现在我做发酵是先挑一环到两环菌丝到种子培养基中，活化之后再接发酵，接种量是种子培养基的10%或5%，这样保证一批是相同浓度. 其实最终涉及到的还是要求精度的问题，因为无论采取哪种方法，有些变量都无法控制，譬如打饼的位置，接种菌丝，以及其他一些影响. 称量菌体的问题，没想到好的办法，不过有人帮忙解决了，嘿嘿. |
19楼2011-04-28 17:27:13
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我和LZ是遇到同样的问题，也和LZ交流过，我替LZ解释一下吧，不是不产孢子，而是孢子很难形成，而且产在载孢体里，无法以孢子数作为接种量的量化指标。我有3个问题： 1、如果采用打饼的话如何量化？是否可以说成100mL发酵培养基加入2个、3个菌饼？ 2、接种量是种子培养基的10%或5%作何解？是指含菌丝的种子培养基占发酵培养基的10%或5%吗？或是以10%或5%的种子培养基接入发酵培养基。但如果菌丝成团而不分散均匀的话，这个方法似乎不准确啊。 3、中试发酵罐为50升，此时如何确定接菌量？ 谢谢cc1000ml 以及楼上各位。  |
20楼2011-04-29 01:06:10
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