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moemoe

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[求助] 求助，纳豆菌发酵过程中出现的问题！已有1人参与

我的纳豆菌从保存斜面上活化一次，再扩培一次，菌悬液都比较浓，但是再接种到我的固体发酵培养基菜籽粕里面就不长了，以前在接种发酵的第二天固体培养基就能非常粘稠，现在突然接菌进去就不长了，请前辈们能分析在我活化和接种过程中会出什么问题导致现在发酵不出来呢？？我的保存斜面已经放了比较久，活化到扩培最后接进去的三级种子液。

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1楼2013-08-06 16:38:40

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zhangbighui

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【答案】应助回帖

★
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laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-08-06 18:04:49

你保存的菌种退化了，建议做一下活化筛选。再有可能你保存的菌种时间较长污染杂菌而使其失去生长优势，可以做一下分离单菌落鉴定。

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2楼2013-08-06 17:06:31

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moemoe

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2楼: Originally posted by zhangbighui at 2013-08-06 17:06:31
你保存的菌种退化了，建议做一下活化筛选。再有可能你保存的菌种时间较长污染杂菌而使其失去生长优势，可以做一下分离单菌落鉴定。

我作了菌种活化，就是在平板上划线分离，挑的单一菌落再接入液体培养基摇床培养，传代两次，这样菌的活性还不能提高吗？在划线分离时没有看到杂菌，也有可能会被污染么？谢谢~~~

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3楼2013-08-06 17:30:48

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zhangbighui

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【答案】应助回帖

单纯的划线分离并不能保证菌种活性的提高，工业微生物的筛选都是用各种选择压力和缺陷型来实现的。不清楚你的菌种是哪里获得的，长时间的保存会有突变的发生，你有之前保留的母种重新做。排除杂菌污染的可能，你有没有考虑发酵培养基的问题，配料比，PH值等会不会影响菌种的生长。

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4楼2013-08-07 08:48:18

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wzq_ing

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同意四楼的方法，先把自己能排除的因素排除掉，这样分析起来就简单些了，也好进行下一步的工作，还是建议从原种接，然后做分析

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5楼2013-08-07 08:53:18

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moemoe

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4楼: Originally posted by zhangbighui at 2013-08-07 08:48:18
单纯的划线分离并不能保证菌种活性的提高，工业微生物的筛选都是用各种选择压力和缺陷型来实现的。不清楚你的菌种是哪里获得的，长时间的保存会有突变的发生，你有之前保留的母种重新做。排除杂菌污染的可能，你有没 ...

谢谢前辈！~虽然之前的斜面保藏的有点久，半年，但是活化出来都长得可以，菌悬液的浓度感觉也很高啊。而且用的是纳豆芽孢杆菌，芽孢菌种应该是可以保藏比较久的吧。再请问前辈，从甘油管里活化出菌种是可以算第一代的吗？？我现在可能会重新活化甘油管里的菌，同时看看我的发酵培养基会不会出问题，不过实在是放在冰箱里的，并且是菜籽粕，感觉不会这么快坏掉的。

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6楼2013-08-08 10:09:01

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