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potential8707木虫 (初入文坛)
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[求助]
发酵罐小试问题
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我做的是大肠杆菌的发酵罐，单位里的大罐已经在生产了，让我做5L的小罐，我也是第一次做，但总是做不到生产上的要求，想在这求助下。 生产上最后发酵液的pH在8.0以上，OD在5.5以上，可我现在将接种量提高了两倍，转数为250 rpm，风量10 SCFH（1 L/min=2.12 SCFH），最后发酵结束后，pH能达标，但是OD远远不行，想问下是不是风量太大了，我下面要怎么改善啊 |
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 大肠杆菌工程菌发酵 |
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我不会跟你扯什么公式，根据经验，大肠杆菌转速800-1000转是完全可以的。5L通气也可以，初期刚接种那会通气和转速不用太高。前2-3个小时可以转速200-300，通气适当小点设个2L就可以了，后期根据生长需要慢慢隔1-2小时稍微加大点通气量，同事慢慢100 100的调转速，直到最终转速到1000 ，这个过程只是一个大概的过程。因为你们那边好像没有溶氧电极。 另外大肠杆菌没有那么脆弱，小罐上的拿点剪切力还是可以承受的，楼上的如果没做过大肠杆菌发酵请不要根据自己的想法误导别人 |
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potential870719楼2012-10-19 13:09:05
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这个是网上搜到的一种工业上生产枯草芽孢杆菌的配方： 1、葡萄糖10 g/L、玉米粉8 g/L、豆粕粉25 g/L、硫酸锰30.8 mg/L、硫酸镁5 g/L、磷酸二氢钠0.52 g/L、磷酸氢二钠2.33 g/L 2、马铃薯200 g,蔗糖20 g,葡萄糖10 g,硫酸镁5 g,酵母膏20 g,硫酸锰30.8 mg,磷酸盐缓冲液(磷酸二氢钠0 后面的显示不全 你可以大概上参考一下，然后变换一下： 葡萄糖10g/L 玉米浆 20g/L 硫酸镁 5g/L 磷酸二氢钠0.52 g/L、磷酸氢二钠2.33 g/L 酵母膏或者蛋白胨20 g/L，初始pH调整为7，再添加你的富马酸，结果应该比现在好一点。 （葡萄糖作为速效C源、玉米浆作为慢速或者廉价碳源、磷酸盐可以一定程度上调节pH，不过这个作用可能不是很明显 酵母膏或者蛋白胨可以当做N源，如果工业发酵想降低成本，这个可以用大豆粕代替 培养基还可以改进 比如添加一些Fe盐或者 发酵后期流加 N源 或者 碳源 ，这个就是后期工作了） 还可以添加5g/L是碳酸钙，那个对调节pH有一定帮助 |
35楼2012-10-25 15:34:38
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zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-23 17:05:26
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zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-23 17:05:26
| 溶氧达不到，pH初始设为7吧。转速设的太低了。最高转速设为1000转（大罐转速不能太高是因为剪切力及功率的问题，小罐不存在这个问题），不过不知道你的培养基是什么，防止起泡，要不时加消泡剂，通气量每分钟和发酵液体积比设为1:1或者通气量更高一点也可以。如果是玻璃罐体还要保证罐内压力为一个大气压（玻璃罐体不耐压，不锈钢的应该没多大问题），还有你的OD600怎么会只有5.5，这也太低了吧。拿普通的营养肉汤或者LB都不止这个啊。接种量5%就差不多了。 |
9楼2012-10-17 10:42:45
10楼2012-10-17 15:29:29
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