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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 发酵罐小试问题
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potential8707

木虫 (初入文坛)

[求助] 发酵罐小试问题

我做的是大肠杆菌的发酵罐，单位里的大罐已经在生产了，让我做5L的小罐，我也是第一次做，但总是做不到生产上的要求，想在这求助下。
生产上最后发酵液的pH在8.0以上，OD在5.5以上，可我现在将接种量提高了两倍，转数为250 rpm，风量10 SCFH（1 L/min=2.12 SCFH），最后发酵结束后，pH能达标，但是OD远远不行，想问下是不是风量太大了，我下面要怎么改善啊
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1楼 2012-10-16 08:40:34
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

看了你的培养基配方了，接种量太少了，发酵罐一般5%-10%接种，0.03%接种不知道是个什么概念。为什么选择40-42℃发酵，会不会是因为大罐的散热系统做的不好，一般大肠杆菌发酵都是37或37以下。培养基中有玉米浆，你怎么确定你的菌浓。
还有一点就是你培养基氮源基本没有，参考别的文献，建议你氮源可以 添加 无机氮源硫酸铵 或者 条件好 添加蛋白胨 或者 氨水 或者 硝酸钾 或者大豆粉。
之前你说你添加氮源，OD好一点了，可能是你的氮源添加的太少了 ，蛋白胨等有机氮源添加 1%的量试一下。
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20楼2012-10-19 13:20:53
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wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+4, 鼓励发帖交流问题。 2012-10-16 20:50:14
小罐和大罐是有区别的，
你的大罐条件是什么样的？？
一般情况小罐的转速和风量应该是要比大罐高一些
关系到溶氧问题和保温稳定等情况
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2楼2012-10-16 12:56:26
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨
★
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-10-16 20:50:23
接种量并不是越大越好，有时候菌体量太大反而会抑制菌体生长，保持原样试试。
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希望大家多多交流。
3楼2012-10-16 14:30:41
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potential8707

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wzq_ing at 2012-10-16 12:56:26
小罐和大罐是有区别的，
你的大罐条件是什么样的？？
一般情况小罐的转速和风量应该是要比大罐高一些
关系到溶氧问题和保温稳定等情况

大罐的转数40rpm，风量400m3/h，我已经提高很多了。溶氧开始在百分之七八十，之后会下降，温度用的跟大罐一样的，41℃。
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4楼2012-10-16 15:21:59
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